高中PCR与凝胶电泳实验教学的探索与改进

PCR及凝胶电泳检测是新课程高中生物学选修模块的实验,两个实验全程都需要很长的时间以致无法在课堂教学时间内完成。充分利用分子生物学实验室的空间布局和相关仪器分布及使用特点,通过预实验对实验程序进行探究和改造,较好解决了这一问题。     

大学学报

槟榔基因组DNA提取及ISSR反应体系的优化Extraction of Genomic DNA of Areca catechu L.and Optimization of Its ISSR-PCR System摘要以槟榔为试验材料,用改良的CTAB法提取基因组DNA,并设置不同梯度分别对每个PCR反应因子做了相应的试验.结果表明：     

新城疫病毒Mukteswar疫苗株全基因组序列分析

通过PCI％的方法对一市售的新城疫Muktesw＆r疫苗株的全长进行分段克隆,通过测序获得全长序列,该病毒全长为15186bp,将全长序列提交到NCBIGenBank中获得序列登录号为JF950509．将其与之前已提交到NOBI GenBank中的Mukteswar株全长序列（登录号为EF201805）比较,核苷酸序列有59处变异,各个蛋白的氨基酸序列总共有16处变异。序列的测定为进一步对Mukteswar抹的研究提供一个良好的平台。     

新课标生物实验室新增实验与试剂盒介绍——人性别鉴定试剂盒

本试剂盒根据Y染色体上特异的基因序列,结合PCR反应原理,精确的提供人性别鉴定所需的全部试剂(包括Taq DNA聚合酶、缓冲液、MgCl2、dNTPs、引物Ⅰ、引物Ⅱ)。使用时,只需按照说明书进行操作即可达到鉴别人     

PCR在临床诊断中的研究进展

聚合酶链反应(PCR)的想法最早出现在1971年麻省理工学院H.G.Khorana教授的一篇文章里,但此后一直没有被付诸实践。80年代中期Cetus公司的Kary Mullis博士重新提出,并在实验室里实现了这个思想。其后短短的几年内PCR就取得很大的进展。尤其是1988年高温Taq酶的应用更使PCR风弥全世界,成为生物学和医学研究的基本工具。在临床诊断方面,PCR主要应用于致病基因突变的诊断。     

生理状态下外周血白细胞y干扰素、白细胞介素2、白细胞介素4和白细胞介素10基因表达的荧光定量PCR检测

目的：建立干扰素-y（IFN-y），白细胞介素-2（IL-2），白细胞介素-4（IL-4），白细胞介素-10（IL-10）基因表达的绝对定量实时PCR检测技术。方法：应用实时定量PCR方法检测25名健康运动员生理状态下外周血白细胞IFN-y、IL-2、IL-4和IL-10 mRNA的表达。结果：应用实时定量PCR方法能够对健康受试者外周血白细胞IFN-y、IL-2、IL-4和IL-10的mRNA表达进行定量分析，相关系数r〉0．99。结论：从分子水平为检测运动过程中细胞因子的改变、评估运动员免疫机能状态提供了简易和准确的检测手段。     

植物多样性的分子生物学研究方法

植物多样性是生物多样性的基础，它的保护和可持续利用是维持全球经济健康发展、全球气候稳定的重要因素之一，也是保持我们赖以生存环境的重要内容。对植物多样性的分子生物学研究方法进行了综述，并着重介绍了分子标记的最新进展及其在植物多样性研究中的广泛应用。     

支原体衣原体性小儿肺炎的流行病学研究

对肺炎支原体(MP)、沙眼衣原体(CT)性肺炎进行流行病学的实验研究。采用痰MP、CT荧光定量PCR结合探针的体外DNA扩增和检测。MP-DNA感染阳性率为8.2%,CT-DNA感染阳性率为6.7%,两者混合感染阳性率为0.27%。小于1岁大于3岁年龄组比较MP感染阳性检出率(x2=28.72,P<0.01)和CT感染阳性检出率(x2=5.80,P<0.05)均有显著性差异。MP阳性检出率秋季与春季比较(x2=7.089,P<0.01);CT阳性检出率秋季与春季比较(x2=60.346,P<0.01)及夏季与春季比较(x2=28.1756,P<0.01)均有显著性差异。MP和CT易感年龄较传统的患病年龄有明显提前趋势,感染季节MP以秋季为主,CT以夏秋季为主。     

PCR技术研究进展

PCR技术是近年发展起来的一种体外特异性扩增DNA片段的新技术,在分子生物学检测与研究中得到广泛应用.本文扼要介绍了PCR技术的基本原理,对PCR技术的方法及特点作了详细阐述,特别是PCR技术在分子生物学的理论研究,遗传病的产前诊断、突变基因的检测、法医学鉴定以及病毒和癌症检测等应用研究的新进展作了综述.预测PCR技术在分子生物学的各个领域的应用具有广阔的前景.     

实时荧光定量PCR应用技术综述

实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)于1992年由Higuchi等人第一次报告:使用EB加入PCR反应体系,经改装的带有CCD的PCR仪检测样品的荧光强度,它的优势性决定了它不仅是一种高敏感、高特异的检测核酸分子的定性方法,而且也是一个能对核酸分子进行精确定量的有力工具。随着分子生物学技术的不断发展,rt-PCR技术取得了突飞猛进的发展,也由此诞生了许多与此技术相关的新的分支学科,极大的推动了分子生物学的发展。