癌基因C-erbB-2的表达与周围型肺癌生物学行为和CT征象的关系

目的：探讨癌基因C-erbB-2在周围型肺癌发生、发展中的作用。方法：采用免疫组化和流式细胞术、聚合酶链反应三种方法检测基因表达是否一致及与生物学行为、CT征象的关系。结果：癌基因C-erbB-2蛋白表达与患者的年龄、性别、TNM分期无关，在肺腺癌中的表达明显高于鳞癌（P（0．05），肺癌的分化程度低、有肺门或纵隔淋巴结转移C-erbB-2蛋白表达明显增高（P〈O．05）。C-erbB-2蛋白表达与深分叶征、棘突征有关；而与肿瘤的大小、短细毛刺征、胸膜凹陷征无关。三种方法检测C-erbB-2蛋白及mRNA表达水平一致．结论：癌基因C-erbB-2在肺癌发生、发展、CT征象中起重要作用，检测这种基因并结合CT征象可作为临床诊断及评估预后的有效指标。     

解脂耶氏酵母杂合启动子的构建

目的：构建一系列新的用于解脂耶氏酵母的杂合启动子。方法：采用PCR技术将pXPR2的一段上游激活序列(UAS-1B)进行了离体串联重复，得到了一系列拷贝数不同的串联重复体，并将其克隆到了pTEF启动子的上游．结果：通过酶切鉴定，确证得到了含有UAS-1B重复单元数目不等的杂合启动子．结论：本方法实用可行，并构建了一系列杂合启动子，为进一步构建高表达水平的解脂耶氏酵母表达栽体奠定了良好的基础。     

基于PrimerHunter的多重PCR引物设计系统的构建与应用

PrimerHunter是一款多重PCR引物设计软件,该软件能够高效地设计出具有特异性的多重引物,但是只能在Linux系统的命令行中运行,而且没有考虑引物二聚体的问题。针对这些问题,文章建立了基于PrimerHunter的多重PCR引物设计系统,实现了PrimerHunter的界面化,完成了C/S模式向B/S模式的转换,同时增加了原软件不具备的引物二聚体检测模块,能够有效检测引物对之间的二聚体情况,为相关生物学领域研究提供了一种高效的多重PCR引物设计工具。     

光纤中光孤子的放大

为克服由于损耗导致的光脉冲展宽,常用周期地放大的办法使孤子波的能量恢复到原始值.对集总放大方式,只要放大器间距LA色散长度LAD,并且入射峰值功率比无损耗时增大GlnG/(G-1)倍,就可以完全抵消光纤的损耗.采用直接微扰方法求解光脉冲传输方程,得出了方程的零级绝热近似解和一级修正.     

植物启动子克隆技术

启动子作为基因表达调控的重要元件,成为分子生物学研究领域的热点。随着PCR技术的发展,从已知序列出发,克隆未知序列的方法日益成熟。综述了近年来植物启动子克隆技术的发展情况,介绍了基于PCR的染色体步行技术,包括:反向PCR(Inverse PCR)、随机引物PCR(randomly primed PCR)、连接介导PCR(ligation-mediated PCR)等方法,重点介绍了TAIL-PCR技术,并对该技术方法的优点及局限性进行了探讨。     

PCR技术的研究进展

PCR技术是20世纪80年代中期发展起来的一种在生物体细胞外通过酶促合成特异DNA或DNA片段的方法,具有高效、灵敏,特异性强等特点,在生物科学各个领域中均发挥了巨大的作用.文章综述了PCR技术的原理、类型及其在在农业、食品工业和医学三个领域的主要应用和研究进展.     

非相干光多级放大的一种新方法

本文基于光折变非线性光学中的光擦除和双光束耦合的基本原理,提出了一种实现非相干光多级放大的新方法,方案表明此方法是可行的.     

Detection of bacterial DNA by PCR and reverse hybridization in the 16s rRNA gene

The clinical diagnosis of sepsis is difficult, particularly in neonates. To devise a rapid and reliable method for identifing bacteria in blood and cerebrospinal fluid (CSF), we developed a pair of primers according to the gene encoding 16 s rRNA, found in all bacteria. DNA fragments from different bacterial species and from clinical samples were detected with polymerase chain reaction (PCR), and with reverse hybridization using a universal bacterial probe, a gram-positive probe and a gram-negative probe. Our results showed that a 371 bp DNA fragment was amplified from 20 different bacterial species. No signal was observed when human DNA and viruses were used as templates. The sensitivity could be improved to 10⁻¹² g. All 26 culture-positive clinical samples (22 blood samples and 4 CSF samples), were positive with PCR. The gram-negative and gram-positive probe hybridized to clinical samples and to known bacterial controls, as predicted by Gram’s stain characteristics. Our results suggest that the method of PCR and reverse hybridization is rapid, sensitive and specific in detecting bacterial infections. This finding may be significant in the clinical diagnosis of sepsis in neonates. Project (396457) supported by the Zhejiang Provincal Natural Science Foundation.     

T克隆载体的构建

以高拷贝克隆载体pUC118为骨架载体,在pUC118质粒Amp~r基因的Eam11057酶切位点上,以点突变的方式封闭Eam11051酶切位点,将一人工合成的具有两个Eam11051酶切位点的互补寡聚核苷酸链(两端具有BamHI接头)插入已封闭Eam1105I酶切位点的pUC118质粒的BamHI位点,构成新的克隆载体,此质粒命名为pUC118E,该载体经Eam11051酶切后,可产生3’端突出一个T碱基的T-vector,能与PCR产物直接连接,经转化大肠杆菌JM109证实,该改造过的pUC118质粒,仍可使宿主细胞具有氨苄抗性,可作为氨苄选择标记的克隆载体。     

聚合酶链反应检测真菌感染的实验研究

本研究以NS5-NS6为引物,扩增真菌同源性序列ssu-rDNA片段,建立广范围真菌检测的方法。用此方法扩增医学主要致病真菌、细菌和人体细胞,结果所有真菌均扩增出一个约310bp的产物,而细菌和人体细胞均扩增阴性,1pg白色假丝酵母菌DNA即可检出。