Reconditional PCR方法在微生物分子生态学研究中的一种应用

虽然PCR扩增过程中所引入的杂和双链分子在TGGE或DGGE图谱分析微生物群落多样性结果时,对分析结果准确性的影响日益受到广泛关注,但迄今为止,尚未提出任何系统的关于去除PCR扩增过程中所引入杂和双链分子的可行性方法.本文将给出一种在克隆前较为有效减少样本中杂和双链的改良方法——“Reconditional PCR”.通过对原初PCR扩增进行上述改进,随后进行的TGGE分析可以更加准确反映种群遗传多样性,所构建的克隆文库也可以更准确地反映原初样本的生物多样性.     

技术风险的社会放大机制——以转基因技术为例

在当代风险社会,技术风险是一种客观层面风险与主观层面风险的统一体。技术风险事件在制度、文化和心理等因素的影响下,通常会发生风险的社会放大效应,导致其影响后果远远超过技术对人类健康和环境的直接伤害,产生间接影响。转基因技术风险具有典型的社会放大效应。技术风险的社会放大分析框架对于我们把握当代技术风险的本质和寻找技术风险规避的对策具有启示意义。     

Association between infection of different strains of <Emphasis Type="Italic">Porphyromonas gingivalis</Emphasis> and <Emphasis Type="Italic">Actinobacillus actinomycetemcomitans</Emphasis> in subgingival plaque and clinical parameters in chronic periodontitis

Objective： The aim of this study was to investigate subgingival infection frequencies ofPorphyromonas gingivalis and Actinobacillus actinomycetemcomitans strains with genetic variation in Chinese chronic periodontitis （CP） patients and to evaluate its correlation with clinical parameters. Methods： Two multiplex polymerase chain reaction （PCR） assays were developed to detect the 16SrDNA, collagenase （prtC） and fimbria （fimA） genes of P. gingivalis and the 16SrDNA, leukotoxin （lktA） and fimbria-associated protein （fap） genes ofA. actinomycetemcomitans in 60 sulcus samples from 30 periodontal healthy subjects and in 122 subgingival plaque samples from 61 patients with CP. The PCR products were further T-A cloned and sent for nucleotide sequence analysis. Results： The 16SrDNA,prtC andfimA genes ofP. gingivalis were detected in 92.6%, 85.2% and 80.3% of the subgingival plaque samples respectively, while the 16SrDNA, lktA andfap genes ofA. actinomycetemcomitans were in 84.4%, 75.4% and 50.0% respectively. Nucleotide sequence analysis showed 98.62%-100% homology of the PCR products in these genes with the reported sequences. P. gingivalis strains with prtC＋/fimA＋ and A. actinomycetemcomitans with lktA＋ were predominant in deep pockets （〉6 mm） or in sites with attachment loss 〉5 mm than in shallow pockets （3-4 mm） or in sites with attachment loss 〈2 mm （P〈0.05）. P. gingivalis strains withprtC＋/fimA＋ also showed higher frequency in gingival index （GI）=3 than in GI=1 group （P〈0.05）. Conclusion： Infection ofP. gingivalis with prtC＋/fimA＋ and A. actinomycetemcomitans with lktA＋ correlates with periodontal destruction of CP in Chinese. Nonetheless P. gingivalis fim4, prtC genes and A. actinomycetem- comitans lktA gene are closely associated with periodontal destruction, while A. actinomycetemcomitansfap gene is not.     

提高PCR反应特异性的几点策略

根据近年来PCR方法的一些新进展，从不同方面综述了提高PCR扩增特异性的方法。     

运用现代科学技术信息放大百米速度素质功能

速度素质不仅反映人体运动的基本活动能力，而且是决定田径运动成绩的基础。近百年来奥运的百米成绩，在高科学技术的参与下，充分发挥了运动员的潜能，不仅跑得快，而且使运动员跳得更高，投得更远。通过科学技术信息的传输与反馈，放大了百米速度素质的系统功能。     

氧化沟污水处理系统中病原菌的检测与归趋分析

利用定量PCR技术,检测氧化沟污水处理系统中各处理单元的病原菌及其指示菌的数量变化状况.检测对象包括大肠杆菌、沙门氏菌和军团菌.结果表明,大肠杆菌uidA基因的进水浓度在10⁸拷贝数/mL左右,从进水到出水减少了2个数量级;沙门氏菌invA基因的进水浓度在10²～10³拷贝数/mL左右,数量较少,并在后续污水处理过程中减少到检出限以下;军团菌16SrDNA基因在氧化沟内检出量较小,大约是10～10²,但在出水样品中的数量与进水差别不大,在10⁴～10⁵拷贝数/mL左右.     

文学翻译手法解读--增减法、异化法和灵感现象理论渊源探究

文学翻译是一种文艺创作活动,在翻译文学文本时既需要传递其信息价值,又要传达其美学价值。在这个过程中有三大手法发挥着重要作用,即增减法、异化法和译者灵感现象。增减法的渊源通过对美学接受论和伊瑟尔阅读理论的论述得以明证,康德提出的人类“共通感”的理论则为异化翻译法的合理性及可行性提供了支持,而柏拉图和黑格尔的灵感论则与文学翻译中译者的灵感现象相关。通过以上论证,最终说明文学翻译中运用的上述手法和现象有法可依、有理可据,它们并非无源之水、无本之木。     

聚合酶链反应检测乙型肝炎患者血清HBVDNA与ELISA检测HBeAg、抗HBe比较研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测了１５３例各型乙型肝炎患者的血清ＨＢＶＤＮＡ，并与ＥＬＩＳＡ法检测的血清ＨＢｅＡｇ和抗ＨＢｅ结果比较．结果ＨＢｅＡｇ阳性８９例，ＰＣＲ法ＨＢＶＤＮＡ检出率为９２．１３％；抗ＨＢｅ阳性２７例，ＰＣＲ法ＨＢＶＤＮＡ检出率为５１．８５％；ｅ系统用性３７例，ＰＣＲ法ＨＢＶＤＮＡ检出率为４０．５４％．提示抗ＨＢｅ血清学转换不能作为乙型肝炎病毒复制与非复制、病变活动与静止的唯一指标，而应该用或同时用ＨＢＶＤＮＡ作为指标才可靠．     

烤鸭肉在储存过程中菌群结构变化研究

探究烤鸭储存过程中菌群的变化,为延长其贮存期奠定理论基础．用酚、氯仿、异戊醇法提取烤鸭肉中细菌的基因组DNA,PCR扩增16SRNAV3区,用DGGE电泳技术分析菌群结构的变化情况,然后用Bionumerics软件对DGGE分子指纹图谱进行烤鸭肉菌群结构相似性分析．PCR结果表明,成功扩增了细菌基因组DNA,为230bp;DGGE实验结果表明,DGGE分子指纹图谱上条带存在显著差异;用bionumberics软件分析,发现样本相似度不断变化,表明在储存过程中,烤鸭肉菌群结构发生了变化．该研究为延长烤鸭肉保质期提供理论参考依据．     

Analysis of Bcl I and Xba I polymorphism in factor VIII gene to detect carriers of haemophilia a in Andhra Pradesh

The efficacy of two intragenic polymorphic markers of factor VIII gene has been examined in Andhra Pradesh population with a view to confirm/revise the strategy for carrier detection that would be precise and economical. The haemophilia A carrier was detected using Bcl I and Xba I polymorphic sites in intron 18 and 22 respectively. The cumulative efficiency of these two sites for detection of carriers is 100% since all 15 families tested were informative for one of these polymorphisms, thus confirming their usefulness for factor VIII gene mutations found in Andhra Pradesh.