西藏山溪鲵乳酸脱氢酶同工酶(LDH)的初步研究

采用聚丙烯酰铵凝胶电泳 (PAGE)对西藏山溪鲵 14种组织的乳酸脱氢酶(LDH)同工酶谱系进行了研究 .酶谱带在各种组织中均表现为 5带型 ,14种组织器官的LDH同工酶可分为三种类型 :第一种为LDH1 及H亚基占优势的 ,包括心肌、生殖腺 ;第二种为H基与M亚基含量近乎相等的 ,包括皮肤、脾、肾等 ;第三种为LDH5 及M亚基占优势 ,包括小肠、胃、肝、肺、肌肉、血清、眼、脑等 .并将对西藏山溪鲵组织LDH同工酶种的特异性及组织特异性成因进行了初步讨论     

大肠杆菌可溶性蛋白质双向电泳条件的建立

本文研究的主要目的是建立大肠杆菌可溶性蛋白质组的双向电泳技术,以等点聚焦为第一向,SDS—PAGE为第二向进行双向电泳,并对样品处理方式、蛋白上样量和染色方法等关键因素和环节进行了比较研究,通过实验条件的筛选和优化获得了较满意的双向电泳图谱。采取的方法具有较高的分辨率和重复性,为进一步研究其蛋白质组学奠定了基础,成功地用于了本科实验教学中。     

毛细管电泳电致化学发光法检测利多卡因

分析了各种分离条件和检测条件对发光强度的影响;并在实验优化的条件下,对浓度在1.0×10-6~1.0×10-4mol.L-1范围内的利多卡因进行检测,发现发光强度与其浓度呈良好的线性关系,线性回归方程为ΔI=11.74c+34.696(c:μmol.L-1),线性相关系数R2=0.991 7。方法的检出限为1.1×10-7mol.L-1,对1.0×10-5mol.L-1的利多卡因溶液进行10次测量,相对标准偏差为1.12%。     

蜂蜜中几种金属阳离子的毛细管电泳测定

应用毛细管电泳间接紫外检测方法,同时对蜂蜜中K＋、Na＋、Mg2＋、Ca2＋四种金属阳离子进行分析测定,系统优化了缓冲溶液浓度、pH、进样电压等实验条件对分离效果的影响.实验采用pH=5的10 mmol/L咪唑—2 mmol/L酒石酸作为背景电解质,20 kV作为分离电压,5 min内实现了K＋、Na＋、Mg2＋、Ca2＋四种金属阳离子的基线分离.所建方法简便快速、灵敏度高,有很高的应用价值。     

Applicability of anoxic-oxic process in treating petrochemical wastewater

To explore the applicability of anoxic-oxic （A/O） activated sludge process for petrochemical wastewater treatment, the relationship between bacterial community structure and pollutants loading/removal efficiencies was investigated by gas chromatograph-mass spectrometry （GC-MS）, polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis （PCR-DGGE） and other conventional techniques. It showed that when the concentrations of the influent chemical oxygen demand （COD） and ammonia nitrogen （NH4＋^-N） were 420-560 mg/L and 64-100 mg/L, respectively, the corresponding average effluent concentrations were 160 mg/L and 55 mg/L, which were 1.6 and 2.2 times higher than those of the national standards in China, respectively, demonstrating the inefficient performances of A/O process. Analysis of GC-MS indicated that refractory pollutants were mainly removed by sludge adsorption, but not by biodegradation. PCR-DGGE profile analysis suggested that the biological system was species-rich, but there was apparent succession of the bacterial community structure in different locations of the A/O system. Variations of bacterial community structure and pollutant loadings had obvious influences on pollutants removal efficiencies. Thus, A/O process was inapplicable for the treatment of complicated petrochemical wastewater, and strategies such as the reinforcement of pre-treatment and two-stage A/O process were suggested.     

注射用酒石酸吉他霉素细菌内毒素检查方法的研究

目的:研究注射用酒石酸吉他霉素对细菌内毒素检查的干扰情况,建立注射用酒石酸吉他霉素细菌内毒素检查法并进行该药品3批供试品的细菌内毒素检查。方法:依照《中国药典》2010年版(二部)附录细菌内毒素检查法。结果:供试品对鲎试剂与内毒素的反应无干扰作用。结论:采用细菌内毒素凝胶法,用两个厂家的鲎试剂对注射用酒石酸吉他霉素及稀释标准品进行干扰试验,在无干扰影响的情况下进行注射用酒石酸吉他霉素供试品的内毒素检查试验。     

中华芦荟不同部位提取物抑菌活性及影响因素的研究

采用双层平板透明圈法研究中华芦荟凝胶与外皮提取物的抑菌效果及芦荟外皮汁的最小抑菌浓度和芦荟皮汁抑菌性的影响因素。结果表明芦荟外皮汁比芦荟凝胶汁有更强的抑菌作用;而芦荟外皮汁对大肠杆菌、金黄葡萄球菌和枯草芽孢杆菌3种指示菌的最小抑菌浓度均为3.125%;芦荟外皮汁最适作用pH为4.5,当芦荟外皮汁的pH超过6.5,完全没有抑菌活性;芦荟外皮汁在100℃下保温1h,其抑菌活性仍达95%以上,说明芦荟外皮汁具有很强的热稳定性;芦荟皮外汁不仅对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌具有良好的抑菌作用,对部分真菌也具有抗性。     

入侵植物五爪金龙全蛋白质提取及双向电泳的优化

五爪金龙是粤东及整个华南地区危害最为严重的入侵杂草之一.探索五爪金龙的全蛋白质提取方法及优化其二维电泳的条件,可以为将来深入研究五爪金龙的蛋白质组学奠定基础.采用TCA-丙酮法、Trizol法以及酚抽提法提取五爪金龙全蛋白质,测定各种方法提取蛋白质的浓度,等量上样于二维电泳11 cm胶条上,结果显示TCA-丙酮法提取五爪金龙全蛋白质的二维电泳图片最好.优化二维电泳条件显示,在用TCA-丙酮法提取五爪金龙全蛋白质,上样量为40μg,等电聚焦总电压30 000 Vh时二维电泳图谱效果最好,重现性最高.     

Soil bacterial and fungal community successions under the stress of chlorpyrifos application and molecular characterization of chlorpyrifos-degrading isolates using ERIC-PCR

研究目的：评价毒死蜱施用后对土壤细菌和真菌群落结构的影响,并对降解功能菌株进行分析。创新要点：通过聚合酶链式反应–变性梯度凝胶电泳（PCR-DGGE）方法,揭示了毒死蜱施用后土壤细菌和真菌群落结构动态变化,并对试验土壤中的降解菌群进行分子鉴定。研究方法：将农田土壤用终质量分数5 mg/kg和20 mg/kg毒死蜱处理,同时以不施用毒死蜱为对照,定期采集土样进行毒死蜱残留测定并提取土壤DNA。将提取的土壤总DNA作为PCR反应模板,细菌群落结构分析采用对大多数细菌16S rRNA基因V3区具有特异性的引物GC-341F和517R,真菌群落结构分析采用ITS区特异引物对GC-ITS1f和ITS2f。DGGE图谱经Quantity One软件进行数字化分析,各泳道中的条带经标准化处理之后,条带的相对光密度构成一个矩阵,用Matlab软件进行主成分分析（PCA）,用Dice法计算相似性指数CS,用MEGA 4.1软件构建系统发育树,进行聚类分析。之后,采用LB、察氏和高氏三种培养基结合的纯培养分离方法,从毒死蜱处理土样中分离具有降解功能的菌株。分别提取纯培养物的染色体DNA,利用ERIC-PCR对分离到的降解菌进行基因组指纹图谱分析,将典型肠杆菌基因间的重复共有序列–聚合酶链式反应（ERIC-PCR）指纹图谱类型的代表菌株进行16S rRNA基因（细菌和放线菌）或ITS区（真菌）扩增并测序,测序结果提交GenBank基因库,并进行BLAST比对,初步确定降解菌株的分子地位。重要结论：本实验条件下,毒死蜱降解符合一级动力学,5 mg/kg和20 mg/kg毒死蜱浓度下的降解方程分别为y=5.252e-0.09x和y=19.41e-0.08x。DGGE指纹图谱显示,毒死蜱施用后土壤真菌群落结构与对照相比发生很大改变,且毒死蜱处理样品真菌群落结构保持基本稳定,多样性指数明显提高（见图2b）;主成分分析显示,毒死蜱处理样品与对照明显分在2个不同的区域,充分表明毒死蜱对土壤真菌群落结构影响迅速且持久（见图3b）。毒死蜱处理样品细菌群落结构只在试验前30天与对照相比明显不同,60天时已经恢复对照水平（见图2a）,同时主成分分析图上,毒死蜱处理样品与对照也越来越靠近,最后聚在一起（见图3a）,说明毒死蜱对土壤细菌群落结构影响短暂。最后,获得了9个典型的ERIC型毒死蜱降解菌株。     

微量全血单细胞凝胶电泳技术在身体机能评定中的应用

单细胞凝胶电泳技术是一种在单细胞水平上检测有核细胞DNA损伤与修复的方法.本文总结了该实验技术的基本原理、方法及应用现状.改进的微量全血单细胞凝胶电泳技术具有敏感性高、取材方便、费用低、实验周期短等优点,对于运动中身体机能的评定具有重要的意义。