叶盘共培养法介导的基因转移与两种转基因植物的鉴定

本文以共整合型Ti质粒载体pGV3850:1103neo中pNOS-NPTⅡ(Km~R)嵌合基因为遗传标志,应用改良的叶盘共培养法对烟草和番茄进行了遗传转化。通过施加选择压力,筛选出具有Km~R表型的愈伤组织,并由此获得转基因烟草和番茄植株。通过胭脂碱的高压电泳检测和生物素探针的尼龙膜印迹杂交,分别从侧面(间接)和正面(直接)证实了Km~R基因在上述两种转化细胞中的整合和表达。还探讨了转化、培养和筛选过程中的一些细节,并对改进技术的原理及其效果进行了讨论。     

推进民办教育可持续发展

改革开放30年来,湖南省各级各类民办学校共培养了300多万毕业生,累计为国家节省教育经费近百亿元。特别是湖南省人民政府湘政发〔2008〕1号文件《关于促进民办教育发展的决定》下发以来,湖南全省民办教育步入了新的发展阶段。     

使用移液器吸头培养三维肿瘤球（英文）

目的：三维细胞培养相较于常规的二维培养在模拟肿瘤微环境上具备很大的优势。本文旨在将移液器吸头（商品化且实验室通用的一种耗材）作为独特的细胞培养容器进行细胞培养,以实现高通量、简单、省时且经济高效的三维细胞球培养。创新点：1.将移液器吸头作为细胞培养容器,其实验过程未涉及任何机械加工和化学处理,因此极大地简化了肿瘤球培养实验过程,为实验条件有限的实验室提供了三维细胞培养的替代方案;2.该培养平台集稳定、便捷、省时、低成本和高通量于一体;3.该平台在培养过程中可进行原位观测;4.除了用于细胞球的培养外,该培养方式还展示出在肿瘤球融合和药物筛选等方面的应用潜力。方法：1.将细胞悬液吸到移液器吸头中,并将吸头置于吸头盒内,然后放入细胞培养箱里进行常规细胞培养。2.培养24 h后,在显微镜下观察细胞团聚形成三维细胞球;可直接推动移液器按钮进行细胞球的转移和后续分析。3.将两个或多个在吸头内形成的细胞球转移到同一个吸头,实现多个肿瘤球的配对和融合。4.待细胞成球后,在移液器吸头内加入药物,评价药物的细胞毒性。结论：1.将移液器吸头作为三维细胞培养平台,通过简单地抽吸和培养,即可在短时间内高通量地获...     

共培养条件对农杆菌介导转化平菇菌丝体的影响

目的:探讨根癌农杆菌介导转化平菇菌丝体的最佳转化条件。方法:以平菇ACCC52857为受体,利用潮霉素B抗性基因作为筛选标记,建立根癌农杆菌介导的平菇菌丝遗传转化体系;探讨乙酰丁香酮(AS)的浓度,根癌农杆菌的浓度,共培养的时间和共培养的温度这四个条件对转化的影响。结果:根癌农杆菌菌液浓度为OD600=0.6~0.7,诱导培养基中添加200μmol/L AS,25℃共培养3~5d,其转化效率最高。结论:对根癌农杆菌介导平菇菌丝转化体系条件的优化,为提高遗传转化效率,以及菌株选育工作奠定基础。