常用聚合酶链式反应（PCR）技术概述

聚合酶链式反应（PCR）技术在过去20多年中,经过不断改良以及与其他研究手段相结合,如今已发展为有数十种之多研究方法的一套技术手段。本文对较常用的几种PCR技术手段的原理、优点、缺点和应用等作了概述。     

血管紧张素原基因CD235Met-Thr变异与高血压脑梗塞发病的相关性

探讨汉族人群血管紧张素原(AGT)基因CD235Met-Thr变异与高血压合并脑梗塞发生的关系.采用突变基因分离聚合酶链反应(MS-PCR)方法检测82例高血压合并脑梗塞患者(BI)、67例单纯高血压患者(EH)和95例健康对照者(C)的M235T等位基因型.BI组AGT基因T/T基因型频率和T等位基因频率(分别为0.720和0.811)显著高于C组(分别为0.516和0.700,P＜0.05)和EH组(分别为0.537和0.716,P＜0.05).结果提示,AGT基因CD235Met-Thr变异增加了汉族人群高血压合并脑梗塞发病的易感性.     

人类新基因HBVDNAPTP1结合蛋白的生物信息学分析

[目的]应用生物信息学分析人类新基因乙型肝炎病毒(HBV)DNA聚合酶(Polym erase)反式调节蛋白(HBVDNAPTP1)结合蛋白(HBVDNAPTP1BP).[方法]利用生物信息学技术分析HBVDNAPTP1BP基因的染色体定位与组织表达,以及编码蛋白的化学物理性质与结构特征.[结果]HBVDNAPTP1BP基因染色体定位于1号染色体短臂3区5带1亚带,可在组织中低表达,但在多个组织中无表达.HBVD-NAPTP1BP的相对分子量为11 905.6,理论pI为7.72,不同条件下的消光系数为14 230 M-1cm-1或13 980M-1cm-1(280 nm),在体外哺乳动物网状细胞中的半寿期为30 h,并且无卷曲螺旋区域,但具有3个较强的疏水区域.HBVDNAPTP1BP无特殊二级结构,仅有1个蛋白激酶C磷酸化位点,不具有跨膜螺旋结构,无信号肽序列,定位于细胞核中.[结论]应用生物信息学对HBVDNAPTP1BP进行了分析,为进一步研究其生物学功能及其在乙型肝炎、肝细胞癌中的作用机制提供了依据和线索.     

与PCR技术有关的常见问题答疑

PCR(polymerase chain reaction多聚酶链式反应)是一种在生物体外迅速扩增特定DNA片段的核酸合成技术,这项技术是由穆里斯(K.Mullis)等人于1988年发明的,为此,穆里斯于1993年获得诺贝尔化学奖。本文针对一些学生有关PCR技术的常见问题予以解答。1PCR所需原料是普通的四种脱氧核苷酸吗?PCR反应体系为何不加ATP加入PCR反应体系的并非普通的四种脱氧核苷酸,而是四种脱氧核苷三磷酸(统称dNTP),即:dATP、     

与“核”共舞的天才少年

10岁时用药瓶和家中的化学物造了第一个炸弹,14岁时制作了一个核反应堆（装配了核燃料以实现大规模可控制裂变链式反应的装置）。如今他17岁了……哇,你猜美国天才少年泰勒·威尔逊还会带给大家什么惊奇呢？     

西藏地区乙型肝炎病毒基因及其亚型的研究

目的 探讨西藏地区乙型肝炎病毒及其亚型;方法 随机选择HBsAg阳性携带者34例,慢性乙型肝炎患者9例,应用FQ-PCR方法检测血清HBV-DNA含量;采用聚合酶链反应限制性酶长度多态性分析法,通过PCR扩增出目标基因片段,然后用特定的限制性内切酶进行酶切,根据酶切图谱进行基因型及亚型的测定.结果 43例HBV-DNA定量阳性血中c基因型占83.72%(36/43例);B型占6.9%(3/43);B、C混合型占4.65%(2/43);D型占4.65%(2/43).B基因型的亚型中Ba6.91%(5/43);B、C型混合型中C2亚型4.65%(2/43).结论 西藏地区HBV基因型以C型为主,B型次之,B型亚型以Ba占优势.     

核酸多聚酶链式反应及其应用

核酸聚合酶链式反应的发明及其应用为目的基因的检测、克隆及表达提供了一个极重要的工具,本文就DNA聚合酶链反应体系、特点及类型进行了综述.     

乳糖诱导Pfu DNA聚合酶基因的表达及酶的纯化

利用乳糖诱导重组大肠杆菌BL21(DE3)中Pfu DNA聚合酶基因的表达。对诱导菌株起始生长量、乳糖浓度和诱导持续时间进行了优化,尝试使用JK110弱阳离子交换柱和Sephadex G-75凝胶层析柱来分离纯化Pfu DNA聚合酶,并用PCR扩增实验检测酶活性。结果表明乳糖可以有效诱导Pfu酶的表达,JK110离子交换柱有较好的纯化效果,从500 mL培养液中可以得到3×105U的酶活,比活达22,200 U/mg,结果好于IPTG诱导表达。     

高中生对DNA复制过程的几个认识误区

很多高中生对高中生物学中"DNA分子复制"过程存在着若干认识误区,以大量文献、资料为知识背景,对这些认识误区加以澄清。     

2011年全国普通高等学校招生全国统一考试(江苏卷)——生物

一、单项选择题 1.下列物质合成时,需要模板的是() A.磷脂和蛋白质 B.DNA和酶 C.性激素和胰岛素 D.神经递质和受体 2.关于人体细胞结构和功能的叙述,正确的是() A.在细胞核内RNA能够传递和表达遗传信息 B.核糖体是蛋白质合成和加工的主要场所 C.线粒体内膜蛋白质和脂质的比值大于外膜 D.高尔基体与有丝分裂过程中纺锤体形成有关