妊娠期阴道白色念珠菌基因型的比较研究

目的明确妊娠期阴道白色念珠菌的基因型是否存在差异,了解不同基因分型方法的优劣。方法对628名妊娠妇女的阴道分泌物进行念珠菌培养和鉴定,以三种方法对比研究不同孕期白色念珠菌的基因型。结果妊娠期阴道念珠菌检出率为31.52%,白色念珠菌为最常见的菌种。INT引物PCR法可将126株白色念珠菌分为A、B、C三组,A组最为多见。EcoRⅠ酶切法可将119株白色念珠菌分为A、B、C三组和9个亚组,A—1亚组最常见。RAPD法扩增后,126株白色念珠菌共获得17种基因型,相似系数SAB=0.805±0.007,不同孕期的组内、组间SAB值均大于0.80。结论妊娠期阴道白色念珠菌具有显著的基因多态性,它们是由基因型非常相似的不同白色念珠菌。INT引物PCR法简便、快速,结果稳定、可靠,适于临床推广应用;RAPD法快速、简便、经济,分辨率高,适于临床和科研应用。     

海宁打开竞争链

水货泛滥,新人频闪,决赛质量低劣,这些毛病使得WTA连续两个赛季都被批评为不够精彩,缺乏深度。如今这一切问题,都可能随着海宁的强势回归迎刃而解,她不仅仅使海宁VS克里斯特尔斯,海宁VS塞琳娜这样的对决重回舞台,更重要的是,她将引起WTA竞争的链式反应。     

PCR技术在中国对虾病毒病检测中的应用

概述了近几年用PCR技术检测中国养殖对虾暴发性病毒病的研究情况及几种常用的检测方法。     

一种嵌合式DNA聚合酶的表达及功能验证

为了建立一套基于大肠杆菌表达系统的嵌合式高保真DNA聚合酶的重组表达与纯化的工艺,首先将含有目的基因的质粒转化至大肠杆菌BL21中,通过高压破碎仪进行细胞破碎,再用离子交换层析方法获得嵌合型高保真聚合酶。优化反应条件显示在28℃自动诱导下表达的嵌合DNA聚合酶蛋白产量较高。利用高压破碎仪将细胞破碎获得可溶蛋白,然后利用硫酸铵沉淀将蛋白粗纯,并采用离子交换层析柱纯化,最终获得较纯的DNA聚合酶。通过对获得的嵌合DNA聚合酶进行活性分析,证实该聚合酶具有高效的活性,为以后大规模生产高保真DNA聚合酶奠定基础。     

PCR及电泳实验的单课时解决方案

“多聚酶链式反应扩增DNA片段”在高中生物新课程中占有重要的地位,但是PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳的实验过程通常需要2h～3h才能完成,所以很难满足中学课时紧的要求,从而阻碍了在中学教学中的推广。针对以上问题,北京川布兰生物技术开发有限公司从研制相关试剂盒出发,将PCR扩增（21min）和琼脂糖凝胶电泳（5min-10min）控制在30min之内完成,从根本上解决了实验过程繁琐耗时长的问题。     

新课标生物实验室新增仪器与建设介绍全自动基因扩增仪（中学专用）PCRINSTRUMENT

全自动基因扩增仪是依据聚合酶链式反应（PCR）原理研制的一种全自动基因体外扩增装置,在生物工程、遗传工程高科技领域有重要的使用价值,在疾病的诊断、转基因生物改良、动植物检疫、性别鉴定以及刑事侦破等方面有广泛的应用。     

Infection frequency of Epstein-Barr virus in subgingival samples from patients with different periodontal status and its correlation with clinical parameters

Objective： To detect the infection frequencies of different genotypes of Epstein-Barr virus （EBV） in subgingival samples from chronic periodontitis （CP） patients, and to discuss the correlation between infection with EBV and clinical parameters. Methods： Nested-PCR assay was used to detect EBV-1 and EBV-2 in subgingival samples from 65 CP patients, 65 gingivitis patients and 24 periodontally healthy individuals. The amplicons were further identified by restriction fragment length polymorphism analysis （RFLP） with endonucleases Afa I and Stu I. Clinical parameters mainly included bleeding on probing （BOP）, probing depth （PD）, attachment loss （AL） in six sites of the dentition. Results： In CP patients, gingivitis and periodontally healthy individuals, the infection frequencies were 47.7%, 24.6% and 16.7% for EBV-1, and 15.4%, 7.7% and 0% for EBV-2, respectively. In 2 out of the 65 CP patients co-infection of EBV-1 and EBV-2 was found. The positive rate of EBV-1 in chronic periodontitis patients was higher than that in gingivitis patients （P=-0.01） and periodontally healthy individuals （P=-0.01）. But no significant difference was shown in EBV-1 frequency between gingivitis patients and healthy individuals （P〉0.05） or in EBV-2 frequency among the three groups （P〉0.05）. In CP patients, higher mean BOP value was found in EBV-1 or EBV-2 positive patients than that in EBV negative ones （P〈0.01）, but with no statistical difference in the mean PD or AL value between EBV positive and negative patients （P〉0.05）. After initial periodontal treatment, 12 out of the 21 EBV-1 positive CP patients did not show detectable EBV-1 in subgingival samples. Conclusion： nPCR plus RFLP analysis is a sensitive, specific and stable method to detect EBV-1 and EBV-2 in subgingival samples. Subgingival infection with EBV-1 is closely associated with chronic periodontitis. Infection of EBV in subgingival samples was correlated with BOP.     

互联网环境下管理知识的链式传递——基于oTMS公司运输管理平台的案例研究

基于互联网的商业生态系统中,涌现出了先进管理知识在多主体参与下沿着供应链自驱动地进行链式传播的现象。但遗憾的是,现有的管理知识转移研究局限在二元主体,不能对此现象给出理论解释。基于传播模式的相似性和系统问题的特点,本文借用核物理中链式反应原理剖析案例中管理知识转移的机制,得出管理知识在系统中出现链式传播的三个关键要素:(1)系统内多方参与,服务供给市场无垄断;(2)原发刺激产生能为企业提高效率的管理知识;(3)企业之间依存度较高。本文的价值体现在:理论上初步发现了多元主体参与下管理知识转移的独有规律,充实了管理知识转移的研究范围和动力来源;实践上为企业管理学习和管理知识利用提供启示。     

引物——生物高考命题的新视点

<正>引物是什么?引物是从哪里来的?引物的碱基序列如何确定?引物有哪些特点?关于引物的基础知识,高中生物教材选修3除了"引物"两字外没有其他任何文字叙述,教学参考资料及教辅资料对引物也没有作相关介绍,师生在这方面的认知可谓空白。而近年来各地调研或高考试题常涉及"引物"类问题,如江苏省2008年生物高考第32题首次考查了有关引物方面的知识,2011年江苏省高考第33题则更多地考查了有关引物的知识。"引物"俨然成为高考命题的新材料、新视点,因此对引物知识的全面了解就显得很有必要。     

三唑磷对斑马鱼miR-99及其预测靶标ckmt2的表达的影响

在农药三唑磷作用下,miRNA的表达发生改变;并通过与靶基因的配对,从而调控基因的表达.本文采用荧光定量PCR和Western blot等方法对miR-99及其潜在靶基因ckmt2的表达变化进行了研究.结果表明,三唑磷处理后miR-99表达是对照的0.062倍,助剂处理是对照的0.414倍,表达下调;三唑磷处理后ckmt2基因是其对照的0.91倍,助剂处理是其对照的0.89倍,在mRNA水平变化不显著.三唑磷及助剂处理后,斑马鱼的总蛋白含量减少,CKMT2蛋白含量增加,采用独立样本检验方法分析结果表明,处理前后的CKMT2蛋白质含量差异显著.综上所述,在三唑磷作用下,斑马鱼miR-99对潜在靶标基因ckmt2的表达可能存在抑制作用,miR-99表达的降低致使对ckmt2表达抑制的作用减弱,从而提高ckmt2的表达.