一种简易提取细菌质粒DNA的方法

对常规碱裂解法小量提取细菌质粒DNA的方法进行了改进,用生理盐水代替溶液Ⅰ重悬菌体,简化了试剂配制的过程,既经济又省力.利用该方法获得的质粒DNA的量及纯度与常规碱裂解法获得的质粒DNA基本一致,完全可以满足基因工程基础实验的要求.此实验是比较适合中学实验室的学生实验,有利于基因工程实验在中学教学中的普及.     

外源DNA导入在小麦育种上的应用

近年来有计划的常规育种操作，使得目前小麦品种的遗传变异范围越来越窄，小麦育种的进一步发展需要利用和开拓丰富的基因资源。外源DNA导入为小麦育种提供了新的途径。本文综述了外源DNA导入的方法，分析了各种导入方法的优缺点。并对其在小麦育种中的应用进行了综述。     

重组质粒pRSET DNA纯化方法的比较

分别采用柱式小量质粒抽提纯化试剂盒和聚乙二醇沉淀法纯化重组质粒pRSET DNA,琼脂糖凝胶电泳和DU800核酸蛋白分析仪鉴定已纯化的重组质粒pRSET DNA的纯度.结果显示,采用聚乙二醇沉淀法纯化重组质粒pRSET DNA:A260/280=1.83,试剂盒所得结果:A260/280=1.91.与试剂盒相比,聚乙二醇沉淀法获得纯化质粒的纯度没有显著性差异,常规质粒纯化实验中可用此法代替昂贵的试剂盒.     

植物生物技术与我国农业的发展

由于在农村推行生产责任制和实行科学种田,近年来我国农业生产有了全面、稳定和持续的增长,初步解决了十亿人口的温饱问题.但是要进一步满足对农产品的需求,仍需要作出巨大的努力,其中包括发展传统的农业科学和尽量采用植物生物技术.植物生物技术包括五个分支领域,即用离体技术改良植物品种、经济植物的快速繁殖、超低温种质保存、植物细胞的大量培养和植物遗传工程,这些领域的进展都会直接或间接地对农业的发展产生影响.本文不打算全面评述植物生物工程的进展,仅就那些在今后5—15年可能在农业发展上产生实际效果的技术作一粗略的估价和展望.     

小鼠Endostatin基因的分子克隆、鉴定及双基因共表达质粒pEgr-IFNγ-Endostatin的构建

目的克隆小鼠内皮抑素(Endostatin)编码区cDNA序列及测序鉴定并构建pEgr-IFN(Y)-Endostatin双基因表达载体.方法从小鼠肝细胞提取总RNA,经逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增获得全长Endostatin基因,测序并利用基因重组技术构建pEgr-IFN(Y)-Endostatin双基因共表达质粒.结果分光光度计测定50倍稀释的总RNA抽提产物,A260=0.834,A280=0.407,A260A280=2.049,总RNA浓度为1.668g/L.EndostatincDNA的RT-PCR产物与载体pMD18T连接并经测序证实Endostatin序列与文献报道完全一致,并构建了含Egr-1启动子的IFNY和Endostain双基因共表达质粒pEgY-IFN(Y)-Endostatin.结论成功克隆小鼠Endostatin基因,构建了pEgr-IFN(Y)-Endostatin双基因共表达质粒.     

转基因大豆质粒DNA标准物质的研制

为了方便、快速地检测大豆及其加工食品中的转基因成分,准确定量转基因大豆的转基因含量,构建含常用转基因插入元件花椰菜花叶病毒Ca MV35S启动子、NOS终止子、新霉素磷酸转移酶基因NPTⅡ、玄参花叶病毒FMV35S启动子和大豆内源基因Lectin-1的质粒DNA标准物质,质粒DNA中靶基因元件均为单拷贝。开展了质粒DNA标准物质的均匀性、稳定性、检测适用性、定值及不确定度评价。结果表明,在实时荧光定量PCR(q PCR)检测中,质粒DNA的4种转基因插入元件分别与大豆内源基因Lectin-1的比值为0.98±0.06(Ca MV35S:L-1),0.95±0.06(FMV35S:L-1),1.05±0.08(NOS:L-1),1.11±0.08(NPTII:L-1)(k=2),靶基因扩增的标准曲线R20.99,可用于转基因检测实验室的结果质量控制,能力验证等活动。     

γδT细胞及其相关研究

T细胞表面表达两类抗原受体：TCRαβ和TCRγδ.γδT细胞是较晚发现的一个T细胞亚群，它的表面分子标志为CD3^ CD4^-CD8^-。从发生、分布、免疫应答的范围和机制等方面来看，γδT细胞在机体免疫系统中处于较原始、低级的地位，主要起辅助、补充作用。     

重组质粒DNA的提取和纯化方法研究

质粒ＤＮＡ的提纯是现代分子遗传学和基因工程的重要技术，本实验对质粒ＤＮＡ的提取和纯化方法进行了比较研究．并通过改进，建立了简便、快速提取和纯化质粒ＤＮＡ的方法．利用此法所提质粒ＤＮＡ收率大，纯度高，能适于细菌转化、细胞转染及酶切分析等进一步实验研究．     

关于近年江苏高考试卷中基因工程题目的思考

基因工程操作程序主要包括4个步骤:目的基因的获取、基因的表达与载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。重组DNA技术(获取目的基因和基因的表达与载体的构建)是整个     

科技杂志要览

肝胚瘤细胞株HepG2中HBx蛋白对SOCS3表达的影响及其机制The influence of Hepatitis B Virus X Protein on the expressionof SOCS3 protein and its mechanisms in HepG2 cells管世鹤[1]潘颖[1]杨凯[1]吴圆圆[1]杨东亮[2]目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白(Hepatitis B virus X protein,HBx)对肝胚瘤细胞株HepG2表达信号抑制因子3(SOCS3)的影响及其机制.方法将表达HBx蛋白的重组质粒FL1-145HBx转染HepG2细胞,以不同浓度的SRC抑制剂PP2处理转染细胞,运用Westem blot和RT-