碘介导氧化型格氏反应制备α,β-不饱和酮

α,β-不饱和酮在生物医药、有机合成、材料制备方面具有广泛应用。格氏试剂和α,β-不饱和醛通常发生亲核加成生成醇。研究了碘介导格氏试剂和α,β-不饱和醛通过一锅反应生成α,β-不饱和酮。研究表明,碘既能引发格氏试剂的生成,又能将格氏试剂和α,β-不饱和醛进行1,2-加成反应生成的醇氧化为酮。对反应的条件进行了优化,并从溴代烃出发制备了8个酮类化合物。反应产物通过核磁共振氢谱进行了表征。     

mCherry标签融合SATB1真核表达质粒的构建

核基质结合蛋白SATB1调控染色质的空间结构,参与真核生物基因表达。本论文通过PCR获得SATB1目的基因,然后与载体mCherry-C1同时用EcoRⅠ和KpnⅠ双酶切后,用T4连接酶进行连接。连接质粒转入感受态宿主细胞并在Kana抗性的LB培养基中培养。分离获得Kana抗性单克隆菌株并进行扩大培养后提取重组质粒。对重组质粒进行双酶切验证和DNA测序检测。本论文成功构建mCherry-SATB1真核表达质粒,为后续研究SATB1的功能机制奠定基础。     

遗传工程的重要载体—质粒

质粒的发现可追溯到40年代.1946年美国遗传学家Lederberg和Tatum在研究大肠杆菌的有性生殖过程时,发现遗传物质的传递总是单向的,只能由供体菌向受体菌转移.这一特性后来确定是由F因子引起的.F因子又叫性因子,其遗传行为和特点明显有别于细菌染色体.因此,Lederberg等推测它是独立于染色体外的DNA分子,并提出质粒(Plasmid)这一概念,代表存在于染色体外能进行自我复制的遗传单位.现已习惯用来泛指细菌、放线菌和酵母中染色体外的DNA分子.     

从双元质粒系统农杆菌中制备微型质粒

国内农杆菌微型质粒ＤＮＡ提取较成功的方法尚未见报导。本法试提供一种快速、高效的提取方法。采用此法，可以避免小量提取繁琐的步骤，操作条件温和，方法简单，易于重复，生产率高，值得推广。     

丙烯酰胺降解细菌质粒抽提方法的比较

所研究的丙烯酰胺降解细菌经鉴定为不动杆菌属。本文采用5种质粒提取方法对2株丙烯酰胺降解细菌进行质粒的抽提,并通过凝胶电泳法与紫外分光光度法对抽提结果进行分析,结果显示适合丙烯酰胺降解细菌质粒抽提的方法是假单胞菌质粒制备法与改进的Kranstad法。     

4种阪崎肠杆菌检测质粒DNA标准物质的研制

实时荧光定量(PCR)方法已成为阪崎肠杆菌的可靠检测方法。为了保证该方法检测结果的准确性、可靠性和可比性,研制了4种质粒DNA标准物质,其分别含有一种阪崎肠杆菌PCR检测靶基因(MMS,ITS,16S r DNA,omp A)。采用紫外分光光度法(UV)和高分辨电感耦合等离子体质谱法(HR-ICP-MS)对标准物质进行定值,对该标准物质的均匀性、稳定性进行了评估,并对定值不确定度进行了评定。结果显示,4种质粒DNA标准物质量值可靠,均匀性和稳定性良好,可以在-20℃下保存1 a以上。4种质粒DNA标准物质的最终定值结果为(52.3±1.8)、(62.4±2.1)、(75.1±2.1)和(85.7±2.6)ng/μL(k=2)。对质粒DNA标准物质与阪崎肠杆菌基因组DNA的可替代性进行了研究,证明研制的质粒DNA标准物质可以替代阪崎肠杆菌基因组DNA对阪崎肠杆菌进行检测,满足阪崎肠杆菌检测实验室质量控制和方法验证的需求。     

Roi基因在三种植物中转化与表达的比较研究

通过改良的叶圆盘转化法,将Ti质粒上的Roi基因(细胞分裂素合成酶基因)转化入一种单子叶植物花叶芋和二种双子叶植物花椰菜和甘蓝的基因组中。在转化后组织当中以及再生植株的苗中,甚至再生植株的无性繁殖后代中均可测得Nos基因的产物胭脂碱的存在。这表明,Ti质粒上的外源基因已经在以上三种转基因植物中得到稳定的整合和表达,新的性状可以随着细胞分裂而传代。     

转基因植物生产食用疫苗的研究进展

目前，用转基因植物生产食用疫苗已成为基因工程的新热点。本综述介绍了用农杆菌Ti质粒介导和以病毒为载体制备生产食用疫苗的策略，表明这是一种最经济而有效的途径。     

质粒与载体

本主要介绍了几种常见的天然质粒和人工质粒及它们作为基因工程载体的应用。     

运动中糖皮质激素及其受体与细胞凋亡的关系

采用献资料法对运动与糖皮质激素分泌、糖皮质激素受体，糖皮质激素与细胞凋亡以及受体介导的细胞凋亡的关系进行研究，探讨糖皮质激素诱导细胞凋亡的机制。