Expression and purification of bioactive high-purity human midkine in Escherichia coli

Midkine is a heparin-binding growth factor,which plays important roles in the regulation of cell growth and differentiation.The non-tagged recombinant human midkine (rhMK) is therefore required to facilitate its functional studies of this important growth factor.In the present work,rhMK was expressed in Escherichia coli (E.coli) BL21 (DE3).The expression of midkine was efficiently induced by isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside (IPTG).After sonication,midkine was recovered in an insoluble form,and was dissolved in guaoidine hydrochloride buffer.Renaturation of the denatured protein was carried out in the defined protein refolding buffer,and the refolded protein was purified using S-Sepharose ion-exchange chromatography.The final preparation of the rhMK was greater than 98% pure as measured by sodium dodecylsulfate-polyacrylamid gel electrophoresis (SDS-PAGE) and reverse phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC).The purified rhMK enhanced the proliferation of NIH3T3 cells.     

章士钊言论自由观的演变——从“苏报案”到“陈独秀案”的考察

章士钊是近代中国有影响的报刊活动家,同时也是政治活动家和知名大律师。从苏报案到陈独秀案,他的言论自由观经历了从无意识到有明确理念、从强调言论自由的个人权利到重视言论自由的政治取向的发展过程。章士钊的言论自由观以自由主义理论为基础,以个人权利为核心,体现了近代报人言论自由认识的较高水平。其言论自由观的演变对于我们认识言论自由意识在近代中国的发展有重要的参考价值。     

提高科技论文引言表达质量的途径

简要介绍引言在科技论文中的作用,针对影响引言作用有效发挥的一些失范现象,从引言内容取材、文献考证和写作要求三方面展开详细论连,分析提高引言表达质量的主要因素．     

谈苏轼词的“多情”

词的特点是长于抒情。苏轼词之所以受到人们喜爱,在于他掌握了词的创作规律,在词中抒发了强烈的感情,从而引起读者共鸣。苏轼是一个多情的词人。他热情澎湃,激情四溢,豪情万丈。所以他的词具有无与伦比的感染力,如火如荼的煽情性。苏轼词中表达了豪情、韧情、亲情、爱情、艳情、真情、怡情、民情、同情、傲情、乡情等。故称苏轼为词中“情圣”乃是当之无愧的。     

国外医学期刊对利益冲突的处理方式与探讨

【目的】 参照国外案例,为国内期刊处理利益冲突提供标准处理流程。【方法】 实例论述NEJM、Chest、Translational Neurodegeneration等期刊处理利益冲突的典型案例,针对可能存在未披露的利益冲突,结合出版伦理委员会的标准建议,制定不同处理流程和处理结果,并提出预防和规避利益冲突的方法。【结果】 提出审稿阶段发现作者存在没有披露的利益冲突和出版后发现论文存在没有披露的利益冲突的处理流程和具体处理结果,处理结果包括刊登撤稿、更正、关注申明等。并提出提高学术期刊对论文涉及的利益冲突的重视程度及制定相关的规范和政策;促进作者对利益冲突的认识并指导其主动披露利益冲突以预防和规避利益冲突。【结论】 医学期刊、编辑应当规范和完善针对利益冲突的相关规定和处理流程,推进期刊国际化进程。     

DCT-BP神经网络在表情识别中的应用

人脸表情识别作为智能化人机交互技术中的一个重要组成部分,近年来得到了广泛关注。本文提出了一种用DCT-BP神经网络算法来识别面部表情,先对图像进行灰度均衡和图像平滑的预处理,然后利用离散余弦变换获取图像的表情特征参数,最后利用前向反馈算法进行识别。     

普通复利公式活用初探

结合算例阐明了普通复利公式活用的重要性。     

发现题材与培育人品——中学作文教学侧议

无话可说是中学生写作文普遍碰到的困难，是作文能力的主要障碍。解决这个问题必须明确作文题材不等于客观事物这一基本事实，并充分认识到题材的实质是主客观的统一体，是写作主体本质力量的对象化，从而在教学中努力贯彻教书育人的方针，切实抓好学生的人品建设，使他们真正走出作文“下笔无言”的困境。     

标志设计的构思与表现

结合标志设计实例,阐述标志设计的构思方法与表现技法.     

“第一换元积分法”的教学设计

换元积分法是不定积分教学中的重点和难点。本文根据高职学生实际和专业特点,结合多年的教学实践和经验,给出了第一换元积分法的教学设计,对教好不定积分,提高课堂教学质量具有一定的实践意义。