人超氧化物歧化酶（SOD）基因的原核表达与蛋白纯化

从人直肠癌细胞株Colo320中提取总RNA,经RT-PCR扩增出SOD基因片段,经限制性内切酶（BamHI,Sinai）酶切后按正确的读码框顺序插入到pGEX-4T-2表达载体上,重组质粒转化大肠杆菌,经菌落PCR和质粒双酶切鉴定、序列测定确认,证实成功地构建了人SOD基因融合表达载体．转化菌经IPTG诱导表达,SDS-PAGE显示有与预期大小约44kD相吻合的融合蛋白带,获得了可溶性表达的目的蛋白,采用Glutathione Sepha—rose4B亲和层析对重组蛋白进行纯化,获得了纯度很高的目的蛋白．     

Up-regulation of mitochondrial antioxidation signals in ovarian cancer cells with aggressive biologic behavior

Objective  

Recently, a high frequency of mutations in mitochondrial DNA (mtDNA) has been detected in ovarian cancer. To explore the alterations of proteins in mitochondria in ovarian cancer, a pair of human ovarian carcinoma cell lines (SKOV3/SKOV3.ip1) with different metastatic potentials was examined.     

模拟酸雨对小麦幼苗SOD和CAT活性的影响

分别用pH为2.0、3.0、4.0、5.6模拟酸雨对小麦幼苗进行急性毒理实验,用紫外分光光度法检测幼苗体内过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）活性.结果表明：pH在3.0左右时,小麦幼苗的CAT和SOD活性最高;在不同酸度的模拟酸雨的胁迫下,CAT和SOD活性的剂量效应关系曲线为单峰曲线,其峰值可以认为是小麦幼苗对酸雨中毒反应的阈值.结论：不同酸度的模拟酸雨对小麦体幼苗CAT和SOD酶活性有诱导作用.     

辛伐他汀对糖基化终末产物致大鼠血管内皮功能损伤的保护作用

目的：探讨辛伐他汀对外源性制备的糖基化终末产物损伤大鼠离体胸主动脉环内皮依赖性舒张功能的影响及其机制。方法：按文献方法制备糖基化终末产物,采用外源性糖基化终末产物（AGE-BSA）孵育大鼠离体胸主动脉环90min诱导血管内皮功能的损伤,并观察辛伐他汀、超氧化物歧化酶和L-精氨酸对糖基化终末产物致的血管内皮依赖性舒张功能损害的影响。结果：外源性糖基化终末产物孵育大鼠离体胸主动脉环90min,明显抑制乙酰胆碱诱导的内皮依赖性血管舒张反应（endothelium-dependent relaxation,EDR）。但对硝普钠诱导的内皮非依赖性血管舒张反应没有影响。辛伐汀（0．05,0．1,0．2μmol／L）与AGE-BSA共同孵育血管环90min,浓度依耐性地改善AGE-BSA对血管内皮依赖性舒张功能的损害。氧自由基清除剂超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD,200U/mL）也可逆转AGE—BSA对内皮依赖性血管舒张反应的损害,而L-精氨酸（L-arginine,L-Arg,3mmol／L）却只有部分保护作用。而且,辛伐他汀也能取消SOD抑制剂二乙基二硫氨甲酸酯（diethyldithiocarbamate,DETC;10μmol／L）．诱导产生内源性氧自由基所致的血管内皮依赖性反应的抑制。结论：辛伐他汀能取消AGE-BSA对大鼠离体胸主动脉环血管内皮依赖性舒张反应的抑制。该保护作用可能与其抗氧化作用有关。     

大蒜生长过程中SOD酶活力变化研究

大蒜是SOD含量较丰富的天然植物之一,本文研究了大蒜生长过程中SOD酶活力的变化,目的：分离提取不同生长阶段大蒜的SOD粗酶;测定大蒜生长过程中SOD活力变化,制定“活力-时间阶段”变化曲线,并研究曲线成因,方法：通过组织或细胞破碎后,可用pH7.8磷酸缓冲液提取出,由于SOD不溶于丙酮,可用丙酮将其沉淀析出,结果：大蒜中SOD酶活力值随生长过程,总体呈现上升趋势。     

2，4-二羟基苯乙酮合水杨酰肼化合物的生物活性及对抗氧化酶活性的影响

用2,4-二羟基苯乙酮合水杨酰肼配体系列化合物来处理水稻幼苗,分析它们对细胞活性的影响及对抗氧化酶系的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性的影响.生物活性测试的结果表明,部分化合物在浓度为0.1～100 ppm时能促进细胞的活性;SOD酶和POD酶活力测试的结果表明,部分化合物在浓度为0.1～100 ppm时对两种氧化酶的活性有不同程度的促进作用.这说明化合物对水稻幼苗生长的影响可能是通过对水稻幼苗SOD酶和POD酶的活力影响的结果.     

疲劳时大鼠肌、肝细胞Ca2+、SOD/MDA比值变化与细胞凋亡的实验研究

运动性疲劳与细胞凋亡时机体内环境的改变有雷同之处,通过对疲劳与细胞凋亡关系的研究,为运动性疲劳的发生机制提供理论依据.采用流式细胞仪(FCM)检测肝、肌细胞Ca2+浓度及DNA倍体分析,末端转移酶标记(TUNEL)技术检测细胞凋亡.结果表明,运动性疲劳后肌、肝细胞中Ca2+浓度显著增高P＜0.01;FCM检测肌、肝细胞实验组均出现凋亡峰;TUNEL染色显示,疲劳时肌、肝组织呈棕黄色的凋亡细胞比例明显增多;各组织SOD活性12 d组显著下降P＜0.01,MDA数量12 d组非常显著升高P＜0.01;研究认为:细胞内Ca2+浓度显著增多、SOD与MDA比值变化是决定细胞凋亡或坏死的主要原因,细胞凋亡与运动性疲劳同步发生,诱导细胞发生凋亡的因素均会导致疲劳.