不同时程下[Ca2+]i介导骨骼肌微细损伤与修复的机制及针刺的干预作用

目的:观察离心运动介导骨骼肌微损伤与修复过程,肌细胞不同微区钙离子浓度变化所起的作用,以及肌浆网钙释放通道兰尼定受体(RyR)的调控信号。方法:114只雄性SD大鼠,分为离心运动(E组,36只)、离心运动+针刺(EA组,36只)、单纯针刺(A组,36只)和安静对照(C组,6只)。E、EA和A组在运动后即刻、6、12、24、48、72 h取材,电镜观察结构,能谱分析Z线和H区钙元素,WB观察磷酸二酯酶-4-D3(PDE4D3)和FK506绑定蛋白12(FKBP12)表达。结果:E与EA组Z线附近的钙离子浓度在运动后即刻和恢复期的12~72 h呈2次上升趋势,其中EA组第2次上升更早且明显。1次离心运动不能破坏RyR的稳定性。结论:运动后即刻的[Ca2+]i升高介导导了损伤,而运动后12~72 h内的第2次[Ca2+]i升高与组织修复有关,此升高非RyR不稳产生"钙漏"而导致的破坏性"钙超载"。研究价值:本研究发现离心运动过后72 h内不同时间段内,钙离子升高具有截然不同的效应,为肌肉损伤和恢复的钙机制研究提供新的方向。     

顺铂联合热处理对术中回收血红细胞及其中混杂的肝肿瘤细胞株(HepG2)的影响（英文）

目的:研究离体热处理和顺铂联合热处理对术中回收血红细胞功能的影响及其中混杂的肝肿瘤细胞株(HepG2)的杀灭作用。创新点:(1)采用多种评价指标研究了不同时间离体热处理对术中回收血中混杂的HepG2的杀灭作用及对红细胞的影响,并确定了对红细胞安全且能有效杀灭HepG2的离体热处理时间。(2)从多个角度评价了离体顺铂联合热处理对术中回收血红细胞的影响及对其中混杂的HepG2的杀灭作用,确定了该方案中对红细胞安全且能有效去除HepG2的顺铂浓度。方法:采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)、5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)和平板克隆形成评估HepG2的细胞存活率、DNA复制率和克隆形成能力(图1和3);从红细胞渗透脆性、携氧能力(2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)、半饱和氧分压(P50))、能量代谢(Na+-K+-ATPase、pH)、膜完整性(游离血红蛋白(Hb)、血清K+和Na+浓度、细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻比例)等角度评估红细胞功能(图2和4;表3)。结论:肝肿瘤术中回收血经离体顺铂联合热处理(42°C,50μg/ml)60min后,能有效清除其中混杂的HepG2,但对红细胞无显著影响,值得体内进一步研究顺铂热处理有效应用于肿瘤手术自体血液回输的安全方案。     

用密度梯度离心法富集源于小鼠胚胎干细胞的运动神经元样细胞前体

目的:我们的目标是从源于胚胎体(EBs)的小鼠胚胎干细胞(mESCs)中分离运动神经元样细胞前体(MNLCPs),以用于发展针对运动神经元疾病的药物筛选试验和移植疗法.天然Shh蛋白(或Shh通路激动剂)和维甲酸诱导的胚胎体中,MNLCPs和未分化细胞的含量是不确定的.如果不把未分化的细胞从细胞培养中充分去除,其可能会干涉药物筛选试验或在移植后增生.我们开发了一种以密度梯度离心法为基础的富集MNLCPs的方法.方法:我们用Wichterle等人2008年改进的方法,将mESCs( HBG3:eGFP:HB9)扩大和分化.通过化学和酶学的无研磨处理,含有绿色荧光蛋白的MNLCPs和未分化细胞的胚胎体被小心轻轻地离解成单细胞.利用OptiprepTM8％～20％逐步梯度离心技术将MNLCPs回收.拥有绿色荧光蛋白的MNLCPs的含量由流式细胞仪检测.结果:我们的结果表明,在胚胎体形成前,mESCs在明胶包被的培养板上生长,其分化为MNLCPs的能力减少.比较mESCs在明胶,明胶与PMEFs,及PMEFs包被的培养板上的生长发现,mESCs在PMEFs包被的培养板上产生含绿色荧光蛋白的MNLCPs的得率为(54.1±11.0)％(x-±s;n=12),在明胶包被的培养板上的得率为(2.8±1.1)％(x-±s;n=9).用密度梯度离心法获得的含绿色荧光蛋白的MNLCPs的平均含量为(87.7±5.5)％(x-±s;n=3).结论:我们的数据表明,不使用细胞分选器,无研磨解离和密度梯度离心法也能用于富集具有高存活率的MNLCPs.有必要对MNLCPs在体外、体内和表型上进行进一步的生理学意义(如神经轴突的生长及形成神经肌肉接头的能力)上的鉴定.     

Ds-echinoside A, a new triterpene glycoside derived from sea cucumber, exhibits antimetastatic activity via the inhibition of NF-κB-dependent MMP-9 and VEGF expressions

Ds-echinoside A (DSEA), a non-sulfated triterpene glycoside, was isolated from the sea cucumber Pearsonothuria graeffei. In vitro and in vivo investigations were conducted on the effects of DSEA on tumor cell adhesion, migration, invasion, and angiogenesis. In this study, we found that DSEA inhibited the proliferation of human hepatocellular liver carcinoma cells Hep G2, with a half-maximal inhibitory concentration (IC₅₀) of 2.65 μmol/L, and suppressed Hep G2 cell adhesion, migration, and invasion in a dose-dependent manner. DSEA also reduced tube formation of human endothelial cells ECV-304 on matrigel in vitro and attenuated neovascularization in the chick embryo chorioallantoic membrane (CAM) assay in vivo. Immunocytochemical analysis revealed that DSEA significantly decreased the expression of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9), which plays an important role in the degradation of basement membrane in tumor metastasis and angiogenesis. DSEA also increased the protein expression level of tissue inhibitor of metalloproteinase-1 (TIMP-1), an important regulator of MMP-9 activation. From the results of Western blotting, the expressions of nuclear factor-kappa B (NF-κB) and vascular endothelial growth factor (VEGF) were found to be remarkably reduced by DSEA. These findings suggest that DSEA exhibits a significant antimetastatic activity through the specific inhibition of NF-κB-dependent MMP-9 and VEGF expressions.     

补充锌元素对高强度运动肾促红细胞生成影响

目的:分析锌元素对高强度运动肾促红细胞生成的影响。方法:选取某体育学院60名男性运动员,将运动员随机分为对照组20人,运动组40人,进行长跑运动训练1周后,根据肾促红细胞血象参数、体重以及运动能力将运动组运动员,划分为运动组20人和补锌运动组20人,持续进行长跑运动和锌元素的补充,观察补充锌元素对高强度运动肾促红细胞血象以及血清肾促红细胞EPO水平的影响。结果:5周长跑运动训练后的运动组运动员与对照组肾促血细胞指标比较,运动组的Hb、RBC和Hct均显著低于对照组(P0.01)。对比补锌运动组和对照组可以看出,补锌运动组的肾促红细胞平均体积(MCV)明显高于对照组(P0.05),其肾促红细胞平均血红蛋白量(MCH)以及红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)明显低于对照组(P0.05),尤其两组的MCHC指标,具有非常显著性差异(P0.01),但两组间剩余肾促红细胞相关参数并无显著性差异(P0.05),补锌运动组的Hb、RBC、Hct水平明显高于运动组(P0.01或P0.05)。补锌运动组运动员的血清肾促EPO水平明显高于对照组和运动组,存在显著性差异(P0.05)。结论:补充锌元素能够促进运动员肾促红细胞的生成,锌元素在一定程度上能够提高机体的运动能力。     

有氧运动对中老年大鼠骨髓内皮祖细胞增殖能力的影响

目的：探讨有氧运动对中老年大鼠骨髓来源内皮祖细胞增殖能力的影响。方法：健康中年雄性 SD 大鼠12只,按体重随机分为两组,即空白对照组和有氧运动组。采用乳酸阈测定法和递增负荷跑台训练建立有氧运动模型,每周训练6天,为期16周。方案结束后12h 提取大鼠骨髓,运用密度梯度离心法分离得到单个核细胞,以 EGM -2培养诱导其分化获取内皮祖细胞,通过双荧光染色法观察细胞对乙酰化低密度脂蛋白的摄取和与荆豆凝集素1的结合,并结合形态学特征鉴定内皮祖细胞。倒置显微镜下计数贴壁细胞数量和计算集落形成率以反映细胞增殖情况。结果：各组贴壁细胞数量第7d 多于第48h(P <0.01);与对照组相比,有氧运动组贴壁细胞数量明显增加(P <0.01),且集落形成率大(P <0.01)。结论：有氧运动能促进中老年大鼠骨髓来源的内皮祖细胞增殖。     

对运动中机体免疫平衡评价方法的思考

在运动科学领域中,研究者通过测定分别产生IFN-y(或IL-2)与IL-4的外周血、脾脏细胞计数(或百分比),脾脏与外周血细胞在培养与刺激条件下分泌Th1、Th2类细胞因子的水平,以及血液中相关细胞因子含量的方法,从细胞数量与功能上来评价运动中机体的免疫平衡状态。分析认为：(1)Th1、Th2细胞在运动中的变化趋势分别与Tc1、Tc2细胞保持一致,Th1/Th2平衡能间接反映T1/T2平衡的变化。(2)相比细胞数量,细胞因子可能更能有效评价运动中的Th1/Th2平衡。(3)通过淋巴细胞分泌的相关细胞因子水平来评价运动中Th1/Th2平衡时,刺激物等实验条件可影响实验结果。(4)循环血中IFN-y、IL-4的含量可用于间接评定运动中的Th1/Th2平衡。通过对运动中Th1/Th2平衡评价方法的分析与评述,以期为未来相关研究的设计提供依据,为其成果内容的表述提供参考。     

运动与特异性免疫细胞

采用文献综述的研究方法,论述了特异性免疫细胞的特点及适度运动和过度训练对它的影响,从而更好地指导运动训练。     

血管内皮生长因子和白细胞介素-12在急性白血病中的表达及临床意义

目的 通过检测急性白血病（AL）患者静脉血清中血管内皮生长因子（VEGF）和 白细胞介素12（IL-12）的含量，探讨VEGF和IL-12在急性白血病中的含量及临床意义。方法 应用定量酶联免疫吸附实验测定10例初诊未治、10例缓解期、5例复发患者和9例正常对照血清中VEGF和IL-12的含量。结果 初诊未治组的VEGF含量（521.06±163.85pg/ml）明显高于缓解组（307.62±55.40pg/ml）及对照组（262.01±141.66pg/ml）（p均<0.05）。对照组的IL-12水平（58.96±38.11pg/ml）与初诊复发组（初诊未治组与复发组的合称32.51±14.58pg/ml）、缓解组（71.67±119.09pg/ml）之间均有显著性差异（p均<0.05）。正常对照组VEGF的含量与IL-12之间存在负相关性。结论 VEGF和IL-12与AL的病情变化有一定的关系。     

间歇性低氧刺激对提高运动能力影响的研究

间歇性低氧训练是由英、美、俄等国逐步发展起来的一种新的、有效的训练方法.选取了具有一定专业运动能力的24名中长跑运动员(15～22岁,男女各半)作为测试对象,观察常压间歇低氧刺激对人体运动能力的影响并探讨可能的适应机制,为进一步深入研究间歇性低氧训练对人体运动能力的影响提供科学依据.实验结果显示,常压间歇低氧训练可以刺...