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常压热水锅炉房设计的几点体会 总被引:1,自引:0,他引:1
近年来,常压热水锅炉用户日益增多,但是目前我国关于常压热水锅炉房设计的规范、规程和标准很少,笔者根据多年从事锅炉房设计工作的实践,对常压热水锅炉房安全措施的设置,热水系统设计及常压和承压热水锅炉的选择等技术要点提出自己的见解. 相似文献
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杨永社 《河北理科教学研究》2001,(3):53-55
1引言 金属表面的磷化,是表面处理的方法之一.表面处理是化学系开设的一门选修课,它属应用性学科,这门课程,学习理论是一个方面,更重要的是进行实验操作.所以在近几年的教学中,我们设计了一些与之相关的实验内容,例如:电镀实验、化学镀实验、钝化实验、阳极氧化实验、磷化实验等. 相似文献
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Chao LIU Xian ZHANG Zhi-ming RAO Ming-long SHAO Le-le ZHANG Dan WU Zheng-hong XU Hui LI 《Journal of Zhejiang University. Science. B》2015,(4)
目的:获得一株高产雄甾-4-烯-3,17-二酮( AD )的Mycobacterium neoaurum突变株。
创新点:获得了一株3-甾酮-Δ1-脱氢酶(KSDD)酶活缺陷型的高产 AD的诱变菌株 Mycobacterium neo-aurum ZADF-4,并采用菌落显色法筛选 KSDD酶活缺陷型M. neoaurum突变株。
方法:(1)诱变方法:采用常压室温等离子体(ARTP)诱变技术来处理出发菌株 M. neoaurum ZAD。ARTP 诱变条件如下:功率40 W ,气流量12.5 L/min,辐射距离1 cm,样品体积10μl,辐射时间为60、90、120、150和180 s;致死率统计优化后,最适辐射时间为150 s,致死率为90%~96%。(2)筛选方法:将ARTP诱变处理后的菌株点种在硝酸纤维滤膜上,30°C培养2 d,然后将长有菌落的滤膜小心取出并漂浮在4 mg/ml二氯靛酚(DCPIP)溶液(0.1 mmol/L磷酸缓冲液pH 7.0),30°C培养1 d直到全部菌落染成蓝色。然后将该滤膜取出,漂浮在250 mmol/L AD溶液(2%甲醇和50 mmol/L Tris pH 7.0缓冲液),室温放置15 min左右,观察菌落颜色变化。KSDD在底物 AD 存在时会脱氢产生雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮(ADD)和H+,H+可以使被DCPIP染成蓝色的菌株褪色。因此,酶活缺陷型的菌株会仍保持蓝色,而酶活高的菌株会褪色为黄色(图3)。(3)对获得的潜在的高产AD菌株进行进一步的酶活检测以及产量验证,以期获得最优的突变株。
结论:获得了4株具有潜在的高产AD能力的菌株,其中,最优的突变株ZADF-4的KSDD酶活相较于出发菌株ZAD下降了81.2%(图4),活性胶也证明其KSDD酶活相较于出发菌株下降明显(图5)。薄层色谱法(TLC)和高效液相色谱法(HPLC)实验证明突变株 ZADF-4中,AD的产量有了明显的提高(图6和图7),提高到了(6.28±0.11) g/L, AD/ADD提高到8:1,AD的摩尔产率达到60.3%(表1)。对出发菌株ZAD和突变株ZADF-4的ksdd基因进行克隆和序列比对,发现ZADF-4的ksdd序列在5'端缺失9个核苷酸(atgttctac),导致3个氨基酸(MFY)的缺失;还发生了两个点突变,其中一个是无义突变(g.15a>6t),另一个是有义突变(g.413c>404t),并引起了相应位置上的氨基酸变化(p.138S>135L)。上述的基因突变及其引起的氨基酸序列的变化可能是引起M. neoaurum ZADF-4中KSDD酶活降低及AD产量提高的主要原因。 相似文献
创新点:获得了一株3-甾酮-Δ1-脱氢酶(KSDD)酶活缺陷型的高产 AD的诱变菌株 Mycobacterium neo-aurum ZADF-4,并采用菌落显色法筛选 KSDD酶活缺陷型M. neoaurum突变株。
方法:(1)诱变方法:采用常压室温等离子体(ARTP)诱变技术来处理出发菌株 M. neoaurum ZAD。ARTP 诱变条件如下:功率40 W ,气流量12.5 L/min,辐射距离1 cm,样品体积10μl,辐射时间为60、90、120、150和180 s;致死率统计优化后,最适辐射时间为150 s,致死率为90%~96%。(2)筛选方法:将ARTP诱变处理后的菌株点种在硝酸纤维滤膜上,30°C培养2 d,然后将长有菌落的滤膜小心取出并漂浮在4 mg/ml二氯靛酚(DCPIP)溶液(0.1 mmol/L磷酸缓冲液pH 7.0),30°C培养1 d直到全部菌落染成蓝色。然后将该滤膜取出,漂浮在250 mmol/L AD溶液(2%甲醇和50 mmol/L Tris pH 7.0缓冲液),室温放置15 min左右,观察菌落颜色变化。KSDD在底物 AD 存在时会脱氢产生雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮(ADD)和H+,H+可以使被DCPIP染成蓝色的菌株褪色。因此,酶活缺陷型的菌株会仍保持蓝色,而酶活高的菌株会褪色为黄色(图3)。(3)对获得的潜在的高产AD菌株进行进一步的酶活检测以及产量验证,以期获得最优的突变株。
结论:获得了4株具有潜在的高产AD能力的菌株,其中,最优的突变株ZADF-4的KSDD酶活相较于出发菌株ZAD下降了81.2%(图4),活性胶也证明其KSDD酶活相较于出发菌株下降明显(图5)。薄层色谱法(TLC)和高效液相色谱法(HPLC)实验证明突变株 ZADF-4中,AD的产量有了明显的提高(图6和图7),提高到了(6.28±0.11) g/L, AD/ADD提高到8:1,AD的摩尔产率达到60.3%(表1)。对出发菌株ZAD和突变株ZADF-4的ksdd基因进行克隆和序列比对,发现ZADF-4的ksdd序列在5'端缺失9个核苷酸(atgttctac),导致3个氨基酸(MFY)的缺失;还发生了两个点突变,其中一个是无义突变(g.15a>6t),另一个是有义突变(g.413c>404t),并引起了相应位置上的氨基酸变化(p.138S>135L)。上述的基因突变及其引起的氨基酸序列的变化可能是引起M. neoaurum ZADF-4中KSDD酶活降低及AD产量提高的主要原因。 相似文献
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通过实验比较了新鲜清补凉在常温和冰箱冷藏条件下亚硝酸盐含量随时间的变化关系,以及清补凉配料中各类食材对亚硝酸盐的富集贡献情况。结果发现常温和冰箱冷藏条件下清补凉的亚硝酸盐含量都随时间的变化先增加后减少,其中室温下放置的清补凉在放置4h后测得的亚硝酸盐含量最高,冰箱冷藏放置的清补凉在放置2d后测得的亚硝酸盐含量最高,而测得的各个分类中的亚硝酸盐含量依次为豆类谷物类水果类椰奶。建议清补凉最好在半小时内食用,放置在冰箱冷藏的时间不宜超过8h。清补凉配料中椰奶和水果要选用较新鲜的或者适当减量。豆类和谷物类可以相对多加一点,尤其是红豆、玉米和紫薯。 相似文献