脂肪酶产生菌的紫外诱变选育

采用紫外诱变方法对实验室保藏的粗酶活为10 U/mL的野生微球菌SX-1进行诱变处理以获得高产酶能力的菌株,实验得到最佳诱变条件为:15 W紫外灯,垂直照射距离为30 cm,处理时间为90 s,通过荧光圈初筛和摇瓶复筛,筛选出一株突变菌株,酶活可达到22.5 U/mL,比出发菌株脂肪酶活力提高了125%,将其连续传代5次,酶活稳定,是一株比较理想的脂肪酶产生菌.     

南极假丝酵母(Candida antarctica)肪酶A在毕赤酵母中的表达、纯化及性质

将编码南极假丝酵母脂肪酶A的基因进行克隆,与pPIC9K连接构建成重组载体.并将其电转化入毕赤酵母GS115中.通过MD和MM平板及PCR扩增,筛选和鉴定重组子.重组细胞经过120 h培养后.发酵液上清酶活达到13 U/mL.聚丙烯酰胺凝胶电泳显示,重组脂肪酶分子量约为50 kD.比原始脂肪酶略大.粗酶液经中空纤维素膜超滤浓缩、硫酸铵分级沉淀和离子柱交换层析后.得到在SDS-PAGE上显示为单一条带的重组脂肪酶.该酶最适反应温度为75 ℃,在70℃保持30 min后,仍具90%以上的活性,最适反应pH值为7.0,在pH6.0～8.0的范围内,具有一定的稳定性.     

南极假丝酵母(Candida antarctica)脂肪酶A在毕赤酵母中的表达、纯化及性质

将编码南极假丝酵母脂肪酶A的基因进行克隆,与pPIC9K连接构建成重组载体,并将其电转化入毕赤酵母GS115中。通过MD和MM平板及PCR扩增,筛选和鉴定重组子。重组细胞经过120 h培养后,发酵液上清酶活达到13 U/mL。聚丙烯酰胺凝胶电泳显示,重组脂肪酶分子量约为50 kD,比原始脂肪酶略大。粗酶液经中空纤维素膜超滤浓缩、硫酸铵分级沉淀和离子柱交换层析后,得到在SDS-PAGE上显示为单一条带的重组脂肪酶。该酶最适反应温度为75℃,在70℃保持30 min后,仍具90%以上的活性,最适反应pH值为7.0,在pH6.0～8.0的范围内,具有一定的稳定性。     

固定化脂肪酶催化合成环十五内酯

优化了环十五内酯脂肪酶固定化条件和环化反应条件.研究表明,利用物理吸附法对脂肪酶进行固定化时,固定化效果与载体的性质、固定化时间、固定化温度等因素有关,且利用NaY型分子筛作为载体,在28℃下固定化脂肪酶20小时,固定化效果最佳.     

反胶束酶水解法生产芥酸的工艺研究

为了优化酶水解法生产芥酸的工艺条件,在AOT/异辛烷反胶束体系中,选择合适的脂肪酶,并考察其水解的影响因素。结果表明:来源于洋葱假单胞菌(Pseudomonascepacia)的脂肪酶对于高芥酸菜子油的水解能力强。当反胶束体系含水量为11,pH值为7.0,菜子油浓度为15%(v/v),水解温度为35℃,反应不到1h,水解率即达到50%;反应24h,水解完全。     

一次性运动对肥胖大鼠脂肪组织HSL和Perilipin基因表达及血脂的影响

目的研究一次性运动对肥胖大鼠脂肪组织HSL和perilipin 基因表达及血脂的影响.方法3周龄SD雄性大鼠,给予10周高脂饲料,建立高脂饮食诱导肥胖大鼠模型.随机分为安静对照组(EC),运动后即刻(E0)、1 h组(E1)、3 h组(E3)、12 h组(E12)和24 h组(E24).用化学法测试血糖、血清甘油三酯(TG)、胆固醇(CHOL)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C);用实时荧光定量PCR法测试HSL和perilipin基因表达.结果与对照组相比,运动后大鼠血糖、血清TG和CHOL水平明显降低或有降低趋势;运动后E0、E1和E3组HSL基因表达明显增加,而运动后E1、E12和E24组大鼠perilipin基因表达显著下调.结论一次性运动导致肥胖大鼠运动后血糖、血脂改善,可能与其脂肪组织HSL基因表达上调以及perilipin基因表达下调有关.     

蛋壳作载体固定化脂肪酶

研究了蛋壳作载体,吸附交联法固定化脂肪酶的最佳工艺;C_(酶)=0.12g·g~(-1)cor,t_(吸附)=30min,pH_(交联)=6.2,t_(温度)=室温,得到的最大固定化酶活力为29.41U·g_(car)~(-1);并考察了该固定化酶的稳定性:pH=9.0,t=35℃,交联后的固定化酶重复使用6次后活力仍保贸53％。     

脂肪酶的化学修饰和磁性化及其应用潜力

脂肪酶催化酯的水解反应,在有机溶剂中催化醇和酸的酯合成反应、氨解反应和肽合成反应、酯交换反应等,通过对脂肪酶进行化学修饰并使其带有磁性,可使酶的稳定性增加,催化效率提高,并且可以回收、重复使用,在食品工业等领域中具有巨大的应用潜力。     

磁场对有机溶剂中脂肪酶催化活性的影响

研究了磁场对有机溶剂中脂肪酶催化活性的影响。磁化溶剂、底物溶液、均能影响脂肪酶的酯合成活力,磁化溶剂对脂肪酶的酯合成活力影响最大0.216T的磁场可使酶的酯合成活力由24.8nm ol/m in.m gPr提高到39.7nm ol/m in.m gPr.水活度较低时,磁场对酶的酯合成活力影响较小,但酶的催化活性较高,随水活度增大,酶的酯合成活力减小,但磁场的影响增大,当水活度增达到0.86时,磁场可使酶的酯合成活力成倍增加。0.09T、0.475T的磁场使酶的最佳水活度aw值减小为0.31,磁场显著影响脂肪酶催化酯合成反应的初速度。