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41.
42.
5种哺乳动物组织DNA提取比较研究 总被引:2,自引:0,他引:2
以大仓鼠、家兔、刺猬等动物新鲜冷冻样品为实验材料,比较了从不同动物的5种样品组织中提取的全基因组DNA.结果表明:从以上三种动物不同样品组织中均能提取到比较纯净完整的基因组DNA,而且从动物肝脏中提取的全基因组DNA纯度和浓度都优于其它材料,能够更好的适用于继后的分子生物学试验研究. 相似文献
43.
DNA分子标记技术及其原理 总被引:10,自引:0,他引:10
综述几种DNA分子标记技术:RFLP是用限制性内切酶切割不同个体基因组DNA后,含同源序列的醇切片段在长度上的差异,可靠性较高、但操作烦琐,信息含量低;染色体原位杂交是利用特异性核酸片段作探针,直接同染色体DNA片段杂交,在染色体上显示特异DNA,准确、直观,但技术非常复杂;PCR是模仿DNA在生物体内的自然复制过程来扩增DNA片段,安全性好,快速易行;RAPD是以人工合成的碱基顺序随机排列的寡核苷酸单链为引物,对所研究的基因组DNA进行PCR扩增,产生多态性的RAPD片段,可以检测多个基因位点,但不能识别杂合子位点;AFLP指纹技术是在RFLP与RAPD两种指纹技术基础上建立和发展起来的,有较高的稳定性,但对基因组纯度和反应条件要求较高;DNA芯片技术是一种以杂交测序基本理论为基础的新型生物技术,用于测序、基因表达、疾病诊断等,但造价、探针的密度与纯度还有待完善;小卫星DNA一般与RFLP技术结合以获得小卫星DNA指纹图谱,信息含量高,但它在染色体上分布不均匀;微卫星DNA既可用作探针获得指纹图谱,也可通过PCR方法进行微卫星位点多态性分析,但工作量大;ISSR即内部简单重复序列,也是一种新兴的分子标记技术,具有很好的稳定性和多态性。 相似文献
44.
将萤火虫萤光素酶基因重组到质粒pBR325中,通过“三亲交配”和同源重组,将萤光素酶基因整合到Ti质粒pGV3850:1103。通过改良的叶盘转化法,用萤光素酶基因转化单子叶植物花叶芋,获得转基因植株。对再生植株的胭脂碱测定、新霉素磷酸转移酶分析、DNA点杂交、萤光素酶基因活性测定,证明萤光素酶基因已转化到花叶芋中并进行了表达。 相似文献
45.
46.
美味猕猴桃基因组DNA的提取条件优化 总被引:3,自引:0,他引:3
采用改良CTAB法以及不同2-巯基乙醇梯度和不同EDTA梯度分离基因组DNA的方法对多糖含量高、极易褐化的美味猕猴桃嫩叶基因组DNA提取条件进行了优化:结果表明,提取缓冲液中加入20mmol/LEDTA及4%、5%β-巯基乙醇的改良CTAB法和40mmol/L、60mol/L、80mmol/L、100mmol/LEDTA及不同浓度的β-巯基乙醇(0%~5%)的改良CTAB法提取效果都比较好。 相似文献
47.
48.
With the availability of the whole genome sequence of Escherichia coli or Corynebacterium glutamicum, strategies for directed DNA manipulation have developed rapidly. DNA manipulation plays an important role in understanding the function of genes and in constructing novel engineering bacteria according to requirement. DNA manipulation involves modifying the autologous genes and expressing the heterogenous genes. Two alternative approaches, using electroporation linear DNA or recombinant suicide plasmid, allow a wide variety of DNA manipulation. However, the over-expression of the desired gene is generally executed via plasmid-mediation. The current review summarizes the common strategies used for genetically modifying E. coli and C. glutamicum genomes, and discusses the technical problem of multi-layered DNA manipulation. Strategies for gene over-expression via integrating into genome are proposed. This review is intended to be an accessible introduction to DNA manipulation within the bacterial genome for novices and a source of the latest experimental information for experienced investigators. 相似文献
49.
碱裂解法是目前最为广泛应用的质粒DNA的提取方法,本人利用0.9%NaC l溶液代替常规方法中的溶液Ⅰ,并缩短了一些步骤的反应时间,既达到了快速、简便提取质粒DNA的目的,又可以满足分子生物学后续实验的要求. 相似文献
50.
口腔脱落细胞DNA检验在刑事案件中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
报道了3起利用口腔脱落细胞成功进行DNA检验的案例,并对其中一些事项进行了探讨。这些案例表明,口腔脱落细胞DNA检验可以在刑事案件中发挥重要的作用。 相似文献