乙醇提取酵母泥谷胱甘肽工艺优化

酵母泥是啤酒发酵过程中的主要副产物之一,约占啤酒产量的1.5%,啤酒废酵母中谷胱甘肽(GSH)含量较高。为提高酵母泥中GSH提取效率,采用乙醇提取法,并通过响应面法对乙醇提取新鲜酵母泥GSH工艺条件进行优化,在单因素实验的基础上,根据Box-Behnken实验设计原理,运用Design-Expert 8.0.6数据统计分析软件,采用三因素三水平的响应面分析法,研究乙醇体积分数、提取温度和提取时间3个因素及其交互作用对提取工艺的影响。确定最优工艺参数是:乙醇体积分数30.98%,提取温度35.81℃,提取时间59.39 min,GSH理论得率0.258%。与优化后的实际得率非常接近,与传统热水提法(0.168%)相比有明显优势,得到的GSH提取条件具有实际应用价值。     

酿酒酵母转化方法的新探索

在现有电转化和聚乙二醇/醋酸锂(PEG/LiAc)诱导的化学转化的基础上,进一步研究和探索了酿酒酵母感受态细胞不同预处理及相应的转化条件对转化效率的影响。结果表明:处于对数生长早期(OD600=0.6)的酵母细胞的转化效果最佳;电转化中分别以120 mmol/L的DTT和300 mmol/L的LiAc预处理感受态酵母菌10 min,可以得到较高的转化效果;联合使用120 mmol/L DTT和300 mmol/L LiAc能大幅提升酵母转化效率,达到7.15×105cfu/μg,PEG/LiAc诱导的化学转化中使用300 mmol/L LiAc能大幅提升酵母转化效率,达到2.75×105cfu/μg,远高于文献报道的水平。同时证明了改进后的转化方法同样能够提高外源DNA同源重组转化效率。