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采用PCR方法克隆获得拟穴青蟹抗菌肽scygonadin基因成熟肽片段,将其连接到Pichia pastoris酵母表达载体pPIC9K中,构建了分泌表达载体pPICgk-Scy.电击转化毕赤酵母GS115,经表型筛选和PCR鉴定证实了目的基因已稳定整合人酵母基因组中.以甲醇诱导表达阳性克隆,上清中表达产物经过Tricine-SDS-PAGE鉴定与预期的目的蛋白大小(约10ku)相符.并利用琼脂孔穴扩散法证明了表达产物能抑制革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的生长. 相似文献
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目的:构建唾液抗菌肽P113基因多拷贝串联重组体,并将其克隆到表达载体pET-28a.方法:根据大肠杆菌偏爱的密码子设计并合成人唾液抗菌肽P113基因,采用PCR技术构建P113基因的自融合多拷贝串联重组体polyP113,BAMH I和HindⅢ双酶切表达载体pET-28a和polyP113基因,将两者连接后转化大肠杆菌DH5α,氨苄青霉素筛选阳性菌落,PCR、酶切、测序鉴定重组质粒.结果:所构建的含有十拷贝P113基因的重组体正确克隆到表达载体pET-28a上,无突变.结论:成功构建含十拷贝唾液抗菌肽P113基因表达框的大肠杆菌表达载体. 相似文献
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昆虫是自然界中最大的一个生物类群,几乎所有的生态环境中都分布有各种各样的昆虫。昆虫之所以能够在千变万化的自然界中占据极大的生存优势,是因为他们具有独特而有效的无细胞免疫系统。当昆虫细胞被感染后,其体内能够快速产生一种免疫诱导分子——抗菌肽(antimicrobial peptides),它具有分子量小,无免疫原性、热稳定性强、广谱杀菌等特性,是昆虫能够抵御自然界中许多有害微生物侵染的重要因素。家蝇生活在杂菌横生的环境中,自身却不会被这些病原所感染,这一现象说明蝇类具有高度的适应能力和有效的防御机制。正是昆虫本身的这些生物特性引起了科学家的兴趣。 相似文献
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英国一项研究发现,人体汗液中的物质可以对抗包括肺结核在内的很多已知病原体。科学家发现,汗液中的化学物质人汗腺抗菌肽能够在略带酸性的含盐汗液中激活,刺透有害细菌的细胞膜,最终杀死这些细菌,例如"超级细菌"和致命的肺结核细菌。科学家希望利用人汗腺抗菌肽研发新型抗生素,其长期功效将超过传统抗生素,因为细菌无法快速 相似文献
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目的:研究不同浓度的异亮氨酸对大鼠空肠形态和抗菌肽表达的影响;方法:选用40只健康断奶SD大鼠,随机分为四组,分别饲喂含有不同浓度异亮氨酸的饲粮(基础日粮+0%、0.5%、1.0%或1.5%异亮氨酸),试验期为14 d.HE染色观察空肠形态变化,通过荧光定量PCR测定空肠中抗菌肽的表达水平.结果:1)对照组大鼠空肠绒毛整齐,黏膜上皮界限清晰,隐窝较浅,0.5%和1.0%异亮氨酸组大鼠空肠绒毛较对照组排列整齐,绒毛较高,隐窝较浅;与0%、0.5%和1.0%异亮氨酸组相比,1.5%异亮氨酸组大鼠绒毛高度较低,隐窝深度增加.2)与对照组相比,0.5%、1.0%和1.5%异亮氨酸均在不同程度上显著提高了空肠防御素rBD -1的表达,其中0.5%异亮氨酸组大鼠空肠防御素rBD -1表达增加了2.3倍,1.0%异亮氨酸组rBD -1表达量增加了13.1倍,1.5%异亮氨酸组rBD -1表达量增加了14.2倍.结论:添加异亮氨酸可显著增加大鼠空肠防御素基因的表达,适量的异亮氨酸对空肠黏膜形态具有改善作用,过量异亮氨酸可能破坏空肠黏膜形态. 相似文献
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大量的β-内酰胺类抗生素,对保护人类健康作出了巨大贡献。随着上述“传统抗生素”的广泛使用,不断产生出诸多如β-内酰胺类抗生素的过敏反应以及长期使用导致抗药菌株的产生。随之发现,某些阳离子型多肽具有广谱的抗菌活性,同时具有“传统抗生素”无法比拟的优越性成为新一代抗菌剂。就其发展过程进行分析叙述。 相似文献
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抗菌肽是指昆虫在外界病菌侵入的情况下,其免疫防卫系统产生的一类防御性肽类活性物质。鳞翅目昆虫抗菌肽不仅分子量小、热稳定好、水溶性好、抗菌谱广,而且在自然界中大量存在,来源相当丰富,因此具有较广阔的应用前景。目前已从鳞翅目昆虫中分离了多种抗菌肽。近年来抗菌肽的研究尤其是分子生物学上的研究取得了较大的进展。本文综述了一些鳞翅目昆虫抗菌肽的抗菌机理、分子生物学研究及其基因的改造、在动植物转基因以及在医药上的应用。 相似文献
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随着当前社会的不断发展,各种环境问题逐渐显现,各种病菌在环境变化的过程中出现了多个层次的变化,在这个过程中,为当前医疗条件造成难题与困惑。在当前制药的过程中,随着各种病菌对药品的抵抗性逐渐增强,人们不得不采取其他措施来对药品药性进行增强。抗菌肽是一种微生物肽,是动植物体内天然免疫防御系统。其在制药的过程中有着通过细胞膜的穿孔而达到抗菌的效果,因此备受人们关注。 相似文献
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为了研究4条人工合成抗菌肽的抑菌和溶血作用。在大肠杆菌悬浮液和绵羊血红细胞悬浮液中,分别加入不同溶度的人工合成抗菌肽,观察其抑菌效果和溶血作用。同时,用圆二色谱仪测定抗菌肽的二级结构。在4条人工合成抗菌肽中,抗菌肽CM-S的抑菌效果为最佳,最小抑菌溶度为25μg/mL,而LB平板菌落的杀菌溶度为50μg/mL;在对绵羊血红细胞的溶血试验中,CM-S在50μg/mL时无溶血作用,100μg/mL时只表现出轻微溶血特性;用圆二色谱仪测定CM-S的二级结构,在2.5%SDS溶液中,208 nm和222 nm出现典型α-螺旋特征峰。人工合成抗菌肽CM-S,含有17个氨基酸,呈典型α-螺旋结构,对大肠杆菌的抑杀效果显著,且溶血性很低,有良好的临床药物开发前景。 相似文献