尖吻蝮蛇出血毒素Ⅲ分离、抗血清制备、与其他出血毒素血清学关系研究

先用DEAE-Sephadex A 50离子交换层析,然后用CM-Sephadex C 50离子交换层析,最后用12%SDS-PAGE制备电泳纯化尖吻蝮蛇出血毒素Ⅲ。将含出血毒素Ⅲ的聚丙烯酰胺凝胶磨细免疫小鼠,制备抗血清。ELISA检测显示制备的抗血清IgG能够与天然的出血毒素Ⅲ结合,Western blot检测结果显示制备的抗血清只与出血毒素Ⅲ特异结合,制备的抗血清可以用于免疫组织化学实验,为以后检测血毒素Ⅲ的结合位点打下了基础。     

沙门氏菌抗血清制备方法在实验教学中的应用

本实验在是教师的指导下以学生为主体完成实验的全过程,要求学生了解实验原理、做好实验计划及设计、准备好动物(家兔),对动物分组并分三个阶段对其实施免疫同时做好抗体滴度测试记录、掌握动物(家兔)的心脏采血、血清分装、时实验过程中容易出现的问题能加以说明.通过本实验增强学生的科学实验能力及敏锐的观察能力,端正他们求是务实的态度.了解了抗体制备的全过程,亦为教师及实验技术人员的实验教学进行了有益的尝试.     

植物病毒抗血清的制备及IgG纯化与酶标技术研究

以烟草花叶病毒（TMv）为例研究了制备植物病毒抗血清的一般方法．以家兔和小白鼠为免疫动物，运用饱和硫酸接沉淀法制备出高效价的兔和瓦抗TMV血清，并运用先进的ELISA方法测定了抗血清中抗体IgG的效价；用醋酸纤维凝胶电泳技术分析了抗血清中抗体的lgG纯度，应用免疫双扩散法检测了提纯的IgG的生物活性．同时还运用成二醛一步法制出高结合率的IgG与过氧化氢酶（HRP）标记的抗体，形成了一整套制备抗血清、纯化IgG并对IgG进行酶标的技术，为植物病毒检测提供了快速简便的方法．     

自身蛋白作载体制备克伦特罗抗血清

本试验以偶氮法将克伦特罗连接到自身全血清和血红蛋白上制成佐剂苗分别免疫兔。免疫后用间接抑制ELISA、间接ELISA检测各组抗体特异性抗克伦特罗效价。结果表明,各组兔血清均含有抗克伦特罗的特异性抗体,显示自身全血清和血红蛋白能作载体,提示自身全血清因组分复杂作载体具有一定优越性。     

临床免疫学检验综合性、设计性实验教学的探索与实践

通过抗血清制备开展综合性设计性实验教学,将医学检验多个学科的常用检验技术有机地综合在整个实验进程中,充分体现实验内容的综合、实验方法的多元性及实验手段的多样性。旨在解决临床免疫学检验实验教学中长期以来内容分散、方法单一、与相关课程割裂、分离等不利于学生知识、能力、素质学习和培养的问题,从而提高学生独立思考、独立解决实际问题的能力、创新能力,以及综合分析、实验动手、数据处理、查阅资料、团队合作、科研等综合能力。     

洋葱黄矮病毒和韭葱黄条病毒外壳蛋白基因的原核表达及抗血清制备

根据已报道的洋葱黄矮病毒(OYDV)和韭葱黄条病毒(LYSV)序列设计特异引物,分别扩增OYDV和LYSV的全长外壳蛋白(CP)基因,插入原核表达载体pSBET后在大肠杆菌BL21(DE3)plysS中诱导表达。通过12%SDS-PAGE和5%～20%梯度SDS-PAGE二次制备电泳纯化诱导产物,免疫小鼠,获得高纯度的抗CP血清。Westernblot分析表明,OYDV与LYSV血清学远缘相关。对大蒜田间样品的间接ELISA检测表明,OYDV和LYSV在田间普遍发生,且通常为复合侵染。两者间微弱的血清学交叉反应对ELISA检测结果影响极小,可用于样品检测。     

昆虫神经毒素AaIT原核表达、纯化及抗体制备

人工合成Aa IT的成熟基因,连接到p ET32载体并转化大肠杆菌,IPTG诱导表达,纯化重组Aa IT蛋白并免疫小鼠,经蛋白质-G柱对抗血清进行纯化.研究结果表明,纯化得到了Aa IT蛋白经免疫小鼠和纯化抗血清得到了特异性强的Aa IT抗体蛋白.     

沙门氏菌抗血清制备方法在实验教学中的应用

本实验在是教师的指导下以学生为主体完成实验的全过程,要求学生了解实验原理、做好实验计划及设计、准备好动物（家免）,对动物分组并分三个阶段对其实施免疫同时做好抗体滴度测试记录、掌握动物（家兔）的心脏采血、血清分装、对实验过程中容易出现的问题能加以说明。通过本实验增强学生的科学实验能力及敏锐的观察能力,端正他们求是务实的态度。了解了抗体制备的全过程,亦为教师及实验技术人员的实验教学进行了有益的尝试。     

多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白抗血清的制备及鉴定

用电泳纯的小麦多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白免疫新西兰雄兔,获得了特异性强,效价较高的小麦.多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白抗血清.用此抗血清采用Dot—immunobinding assay,对流免疫电泳二种方法测定PGIP的检出限量,由此建立了多聚半糖醛酸酶抑制蛋白的Dot—immunobinding检测方法,并对制备该抗血清的意义予以讨论.     

人生长激素的单克隆抗体放射免疫分析法和免疫放射分析法

利用抗HGH单克隆抗体建立了HGH的RIA和IRMA。方法学鉴定表明,这两种测定方法的灵敏度高(RIA为1.2ng/ml,IRMA为2ng/ml)、特异性强(与HPL及HPRL均无交叉反应)、重复性好。同时,还将这两种方法与HGH常规抗血清RIA进行了比较。