影响聚式酶链式反应实验效果的基本因素

研究聚式酶链式反应(PCR)实验中影响其扩增效果的多种因素,寻求反应体系中理想的各因素浓度配比。选取含5+10优质亚基的小麦品种为材料,以特异扩增1DX5基因PCR实验为例,从模板DNA、引物终浓度、Taq酶、二价镁离子、4dNTPs混合液、缓冲液浓度几方面入手,通过设计梯度实验,研究不同因素对PCR扩增效果的影响。结果表明,反应体系6个基本因素,缺少任何1个都扩增不出产物。在反应总体积25μL的PCR反应体系中,模板DNA选用32 ng/μL,Mg2+终浓度2 mmol/L,Taq酶1.2 U/25μL,引物0.8μmol/μL,4dNTPs0.3 mmol/L,缓冲液1×buffer最为合适,能扩增出理想的结果。     

磁性琼脂糖微球活化条件的研究

对环氧氯丙烷活化琼脂糖磁性微球的活化条件进行了研究。以微球表面的环氧基密度为指标,考察了活化时间、Na OH浓度、环氧氯丙烷体积分数、Na BH4浓度和活化温度等因素对琼脂糖磁性微球活性的影响。实验结果表明,环氧氯丙烷活化琼脂糖磁性微球的最优条件为活化时间为4 h,Na OH浓度为0.9 mol/L,环氧氯丙烷体积分数为40%,Na BH4的浓度为0.5g/L,活化温度为40℃。     

利用CTAB法提取蝴蝶兰的基因组DNA

利用CTAB法对蝴蝶兰的根、叶、花等不同部位进行基因组DNA的提取,然后分别用紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳法检测DNA的质量,结果表明,3个部位都可以获得较完整的基因组DNA,电泳条带清晰,无拖尾现象.其中根部提取的DNA纯度最高,OD260/OD280为1.654 5;其次为叶,OD260/OD280为1.535 1;花的DNA纯度最低,仅为1.382 O.     

微型磁笔快速提取动植物DNA

目的:探索用微型磁笔进行动植物DNA快速提取与电泳鉴定的实验研究。方法:取菜叶0.1g或人类全血0.1mL、磁珠悬液0.25mL,选择性结合DNA、洗涤、洗脱、电泳即得。本法不需离心,不用大量检材,用微型磁笔在离心管中微量操作,分离纯化DNA只需30min,电泳只需50min。结果:可以观察到清楚明亮的DNA条带,使学生同时掌握了正规DNA提取和琼脂糖电泳二项技能。结论:本方法是对分子生物学、医学遗传学实验的一大改进,它操作简捷直观、降低了实验成本,提升了实验水平,使得高纯度DNA的提取实验今后可以在大学、中学的生物学、遗传学实验室进行,给更多的学生和教师、科研人员参与生命科学的研究提供了机会。     

在琼脂糖中“驻留”的草履虫

草履虫个体结构简单,微小、透明,但在显微镜下,游动快导致内部结构不易观察清楚,使"观察草履虫"实验成为初中生物学实验教学的难点之一。本文介绍采用"琼脂糖"为基质开展实验,效果比较明显。     

高温抗药性细菌的质粒检查

从堆肥和污泥中分离得到一批高温抗药性细菌，经琼脂凝胶电泳检查，发现其中-菌株T703-S1有质粒存在。     

不同保存条件下培养细胞中DNA完整性分析

比较不同方法保存培养的人胃癌SGC7901细胞,用QIAGEN DNA提取试剂盒提取DNA,琼脂糖凝胶电泳检测DNA提取效果,找到一种简便、经济的保存方法.结果显示,0.85%NaCl和细胞保存液保存5 d的效果好,而0.85%NaCl更经济实用.     

新课标生物实验室新增仪器与建设介绍——电泳仪和水平电泳槽

电泳仪和水平电泳槽是分子生物学的重要工具,是对PCR扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳检测分析不可缺少的仪器。     

医学专科开设琼脂糖凝胶电泳实验的教学体会

琼脂糖凝胶电泳是生物化学中常用的分离技术之一,在医学基础研究及分析中有广泛的应用。本文结合医学专科院校琼脂糖凝胶电泳实验的开设,对从实验前的各项准备工作到学生实验的教学过程及实验课后的思考等方面进行分析和总结,以期为今后的实验教学改革提供参考。