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PCR( polymerase chain Reaction──聚合酶链反应,简称PCR)是一种体外扩增特异性 DNA片段的酶学方法。其原理是:用一对寡核苷酸作为引物,引导 DN A聚合酶在引物识别位点之间的两条互补链上进行DNA合成。经过模板变性、引物复性、引物延伸三步反应的多次循环,可使特定的DNA片段在数量上呈指数增加。这项操作简单、省时且已实现自动化的先进技术,已成为分子生物学及临床医学等理论研究和实际应用的重要工具。本文将阐述近年来几种PCR技术的改进与应用。 一、PCR固相分析 1988年Syvanen等首先将 DNA固相技术引入PCR扩增产物的定量研究中,该法采用了DNA的5’端被生物素(biotin)修饰的PCR引物,使扩增DNA序列的末端均带生物素,接着在溶液中用同位素标记探针与扩增序列杂交,杂交链借5’端生物素结合在能与其特异结合的亲合素(avidin)包被的固相载体上(即 相似文献
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聚合酶链反应 (polymerasechainreaction ,简称PCR)是 2 0世纪 80年代中期发展起来的一种特异性DNA体外扩增技术 ,它具有快速、简便、灵敏和特异性强等优点 ,在生命科学研究领域得到广泛应用。文章就PCR技术的基本原理、特点及其在分子生物学、医学检验领域的应用及进展作一综述。 相似文献
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INTRODUCTION Plants have defense mechanisms against patho-gen infection by inducing systemic resistance in re-sponse to localized pretreatment with biological cotrol agents, thus making them resistant to subsequpathogen infection (Caruso et al., 1999; Hammschmidt, 1999; Mohammadi and Kazemi, 2002; yada et al., 1995; Pozo et al., 2002; Ray et al., 199Biological control of plant pathogens has receivmuch more attention. It is well known that plants amicroorganisms symbiosis is a defense m… 相似文献
7.
<正>1限制性核酸内切酶是如何命名的?怎样理解其识别序列的特异性和切割位点的特异性?限制性核酸内切酶的命名,目前主要以Smith和Nathans的命名系统为基础, 相似文献
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影响聚式酶链式反应实验效果的基本因素 总被引:1,自引:0,他引:1
研究聚式酶链式反应(PCR)实验中影响其扩增效果的多种因素,寻求反应体系中理想的各因素浓度配比。选取含5+10优质亚基的小麦品种为材料,以特异扩增1DX5基因PCR实验为例,从模板DNA、引物终浓度、Taq酶、二价镁离子、4dNTPs混合液、缓冲液浓度几方面入手,通过设计梯度实验,研究不同因素对PCR扩增效果的影响。结果表明,反应体系6个基本因素,缺少任何1个都扩增不出产物。在反应总体积25μL的PCR反应体系中,模板DNA选用32 ng/μL,Mg2+终浓度2 mmol/L,Taq酶1.2 U/25μL,引物0.8μmol/μL,4dNTPs0.3 mmol/L,缓冲液1×buffer最为合适,能扩增出理想的结果。 相似文献
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于智勇 《扬州教育学院学报》1999,(4)
核酸聚合酶链式反应的发明及其应用为目的基因的检测、克隆及表达提供了一个极重要的工具,本文就DNA聚合酶链反应体系、特点及类型进行了综述. 相似文献
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通过对教材及文献资料的分析论证了DNA转录不需要“单独的”解旋酶,以求解决目前困扰教师和学生们的这一争议问题. 相似文献