嗜水气单胞菌的致病性和免疫性研究

嗜水气单胞菌是近年来水产细菌病害学研究的热点．从致病性角度，研究者已经对嗜水气单胞菌完成了较多的研究，这些研究主要包括：嗜水气单胞菌的外毒素，蛋白酶是其重要的致病因子，对宿主有较大的破坏作用；嗜水气单胞菌的S蛋白对嗜水气单胞菌入侵生物体内起到保护作用：嗜水气单胞菌的W型微毛是其在动物体场中的定居因子．从免疫学的角度，研究者主要对各种苗苗、外毒素、蛋白酶、S蛋白及外膜蛋白的免疫原性，各种动物对这些抗原的免疫应答差异作了较多的研究，利用这些免疫学性质，也促进了嗜水气单胞菌的致病因子及其免疫保护的研究．     

浙江养殖鱼类暴发性流行病病原的研究——Ⅰ.嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)的分离、致病性及生理生化特性

从患病鲫、鲢、鳙、鳊等鱼体上分离出一菌株,经腹腔注射及浸泡感染,能引起鱼患典型的出血病症和死亡,其半数致死量(LD_(50))为1.48×10~5个菌/鱼.该菌发酵分解糖类,氧化酶和过氧化氢酶实验为阳性,具极生单鞭毛,革兰氏阴性,对弧菌抑制剂不敏感,经生理生化特性测定及形态、培养特征观察,确认为嗜水气单胞菌(Aermonas hydrophila).并测定了该菌对抗生素的敏感性及生长特性。     

嗜水气单胞菌的致病性研究

自患红脖子病的中华鳖中分离的嗜水气单胞菌菌株对小白鼠有致死性，腹腔注射小白鼠的24h半致死剂量为6×105／g，对中华鳖腹腔注射在7d内的半致死量（LD50）为1．18×1010／g中华鳖（体重）．腹腔注射感染、灌胃感染、水体感染和伤口感染还可导致中华鳖慢性感染，致死时间在20d以后．水体感染产生中华鳖红脖子病的全部症状．     

两种病原菌感染后海鳗肝脏的组织病理学研究

用鳗弧菌（Vibrio anguillarum）和嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）分别感染海鳗（Muraenesox cinereus）,48h后取样,光镜观察肝脏组织结构在感染前后的变化．结果表明：与对照组相比,海鳗感染嗜水气单胞菌后,肝细胞索排列紊乱,血窦扩张,肝细胞肿大并空泡化,部分肝细胞破裂,细胞轮廓模糊不清．感染鳗弧菌者较感染嗜水气单胞菌者病变现象更明显,肝细胞多数破裂,细胞核圊缩、破裂、溶解,只剩下肝组织结构的网状支架和细胞碎片．     

Protection of Carassius auratus Gibelio against infection by Aeromonas hydrophila using specific immunoglobulins from hen egg yolk

Specific immunoglobulin （IgY） from egg yolk against Aeromonas hydrophila was produced by immunization of White Leghorn hens with formalin-killed whole cells of A. hydrophila. ELISA test using A. hydrophila as the coating antigen revealed that the specific antibody titer started to increase in the egg yolk at the 13th day post-immunization （P/N=2.18）, reached the peak at the 56th day （P/N= 13.82）, and remained at high level until day 133 （P/N=7.03）. The antibody was purified by saturated ammonium sulphate with a recovery rate of 63.5%. The specific IgY inhibited the growth ofA. hydrophila at a concentration of 1.0 mg/ml during the 18 h incubation. Pre-treatment of polyploid gibel carps Carassius auratus Gibelio with specific IgY had a protection rate of 60% （6/10） against challenge with A. hydrophila, while none of the fishes in the control groups receiving sterile phosphate buffered saline （PBS） or non-specific IgY survived the challenge. Treatment of fishes with the specific IgY 4 h after the challenge also had lower mortality （70%, 7/10）, a 30% reduction against the control PBS or non-specific IgY groups （10/10）. These results indicate that specific IgY antibodies could be obtained easily from hens immunized with an inactivated A. hydrophila and could provide a novel alternative approach to control of diseases in fishes caused by this organism.     

几种消毒剂抑菌效力的研究

稳定态二氧化氯(Stabilized Chlorine Dioxide, SCD)是水产养殖中常用的一种消毒剂。实验表明SCD对嗜水气单胞菌和脑膜脓毒黄杆菌及温和气单胞菌均有抑制作用,且在10mg/L效果最佳,并讨论了SCD和两种季铵盐类消毒剂对温和气单胞菌的作用。     

嗜水气单胞菌AH1的生物学特性研究

测定了嗜水气单胞菌AH1在TSB培养基中的生长曲线进行研究,结果表明,O-4h属于延滞期,18h时活菌落总数达到最高峰至7.3,28h后细菌后进人衰亡期;并且此过程中活菌数的对数值与OD600呈线性关系Y=17．081x-0．226。嗜水气单胞菌AHI在生理盐水、PBS和TSB液体中4℃保存的存活状况曲线表明：该菌属于一种生存能力较强的细菌,前期不易死亡,后期死亡较快。     

杀鲑气单胞菌单克隆抗体的制备及其特性分析

应用杂交瘤单克隆抗体技术制备了6株分泌抗杀鲑气单胞菌杀鲑亚种的单抗细胞株,并对其特性进行分析。结果显示:6株单抗中IgM有3株,IgG1有2株,IgG2a有1株,且抗体效价为1:12800—1:51200,检测灵敏度为1.0×105—1.0×108cfu·mL-1。进一步实验证实这些单抗与其他病原菌都无交叉反应。但单抗5C7、7H6与杀日本鲑亚种有交叉反应;单抗8A2与无色亚种存在阳性反应。表明杀鲑气单胞菌亚种之间既有独特的抗原决定簇,又有共同抗原位点。制备的单抗可用于杀鲑气单胞菌的快速诊断和亚种鉴定,为该菌的进一步研究提供必要手段。     

国内致病性嗜水气单胞菌研究现状

嗜水气单胞菌是一种入一兽一鱼共患病病原,近年来引发的动物疾病呈上升趋势。关于嗜水气单胞菌的致病性、致病机理、诊断与检测技术和疫苗制备等,国内已有一定的研究,本文将其研究现状作一综述。     

嗜水气单胞菌的分离及其生理特性

自患红脖子病的中华鳖中分离一株细菌，经鉴定为嗜水气单胞菌．该菌株在Arg，Leu，Asp和Met4种氨基酸为碳源的合成培养基生长良好，最适生长条件为pH7．0，28℃以及液体培养基中溶解氧7．5～10g／L．在合成培养基础上，氨基酸Ser，Val，Trp，Ala和Phe有较强的促进嗜水气单胞菌生长的能力．锌离子抑制细菌的生长；低浓度的铁离子对细菌生长有一定的促进作用．镁离子则是嗜水气单胞菌生长必须的．胺基糖类抗菌素（青霉素类）对嗜水气单胞菌不抑制．