意大利蜜蜂(Apis mellifera L.)飞翔肌发育过程中线粒体的形态与发生

意大利蜜蜂飞翔肌发育过程中的线粒体是多种多样大小不一的,由生理功能需求而定。观察结果表明,意大利蜜蜂飞翔肌线粒体的发生有两条途径:①重新形成,即由肌质分泌出来的蛋白质和脂肪自发装配而成;②由现有线粒体复制出双层膜囊,再形成新的线粒体。这是飞翔肌线粒体发生的独特之处。     

在意蜂群内培育中蜂王抗中蜂囊状幼虫病的效果及其抗病机制探索

中华蜜蜂和意大利蜜蜂是两个较为接近的物种,其形态学特征和生物学特性有许多相似之处,但它们之间无法进行生殖杂交,存在生殖隔离。应用营养杂交技术,将中华蜜蜂受精卵发育的早期幼虫介绍到意大利蜜蜂蜂群中进行适当培养饲喂,结果培育的蜂王后代具有抗中蜂囊状幼虫病病毒的特性。作者就营养杂交王的抗病效果和抗病机制进行探讨,以期为广大蜜蜂饲养者和研究者提供研究思路。     

西方蜜蜂一个新表皮蛋白基因的克隆和结构分析

利用西方蜜蜂雄蜂头部5’LongSAGE文库中的一组标签序列,在蜜蜂基因组序列第9号连锁群上定位一个新的西方蜜蜂表皮蛋白基因转录起始位点,并克隆了该基因的eDNA序列,继而利用此cDNA序列分析了该基因的内含子和外显子结构．分析结果显示：该基因的DNA序列长1253bp,含有4个外显子和3个内含子,其cDNA长598bp,编码一个169AA的富含Val和Pro残基（23．67％,20．12％）多肽序列．BLAST分析发现,该蛋白与已知的4个昆虫表皮蛋白序列的相似性为47．54％,且其C末端有一个共有基序,说明这5个蛋白可能属于同一个表皮蛋白家族．该研究结果提供了一个新的蜜蜂表皮蛋白基因,且该基因在雄蜂头部表达水平较高．     

Expression of a bee venom phospholipase A2 from Apis cerana cerana in the baculovirus-insect cell

Bee venom phospholipase A2(BvPLA2) is a lipolytic enzyme that catalyzes the hydrolysis of the sn-2 acyl bond of glycerophospholipids to liberate free fatty acids and lysophospholipids.In this work,a new BvPLA2(AccPLA2) gene from the Chinese honeybee(Apis cerana cerana) venom glands was inserted into bacmid to construct a recombinant transfer vector.Tn-5B-4(Tn) cells were transfected with the recombinant bacmid DNA for expression.Sodium dodecylsulfate-polyacrylamide gel electrophoresis(SDS-PAGE) analysis revealed a double band with molecular weights of 16 and 18 kDa.Products of hexahistidine AccPLA2 fusion protein accumulated up to 5.32% of the total cellular proteins.The AccPLA2 fusion protein was cross reactive with the anti-AmPLA2(BvPLA2 of the European honeybee,Apis mellifera) polyclonal serum.The reaction resulted in a double glycosylation band,which agrees with the band generated by the native AmPLA2 in Western blot analysis.The PLA2 activity of the total extracted cellular protein in the hydrolyzing egg yolk is about 3.16 μmol/(min·mg).In summary,the recombinant AccPLA2 protein,a native BvPLA2-like structure with corresponding biological activities,can be glycosylated in Tn cells.These findings provided fundamental knowledge for potential genetic engineering to produce AccPLA2 in the pharmaceutical industry.     

用5＇ LongSAGE标签分析蜜蜂Yps基因转录起始位点的多样性

使用5＇ LongSAGE标签序列确定了一个新的西方蜜蜂Ypsilon Schachtel（Yps）基因的转录起始位点,并进而预测了该基因的启动子序列．5＇ LongSAGE标签的蜜蜂基因组定位结果表明：在成年雄蜂的头部中,蜜蜂Yps基因存在23个转录起始位点,其中优势转录起始位点有4个,其起始频率分别为27．9％、23．1％、13．5％和11．5％．Yps基因TSS的碱基组成分析发现,此23个TSS第一个碱基为A、G、T、C的概率分别为52％、39％、4%、4％．这些结果暗示RNA聚合酶和调控因子在Yps基因启动子的一个较宽范围内的互作控制着不同转录本的起始效率．