巯基乙醇对黄粉虫NAGase活力的影响

以黄粉虫幼虫为材料,采用0.05 mol/L pH 7.5 Tris-HCl缓冲液抽提、硫酸铵分级分离提取N-乙酰--βD-氨基葡萄糖苷酶(NAGase,EC 3.2.1.52),获得比活力1025 u/mg的酶制剂.研究NAGase催化pNP-NAG水解反应的动力学参数,测得米氏常数Km=0.384 mmol/L,探讨巯基乙醇对该酶活力的影响.结果表明,巯基乙醇对该酶活力具有显著的抑制作用,其抑制作用显示可逆过程,研究巯基乙醇对该酶的抑制类型,显示其抑制效应为混合型,KI和KIS分别为1.9%和9.6%.     

维生素类物质对黄粉虫NAGase活力的影响

用Tris-HCl缓冲液抽提、硫酸铵分级沉淀从黄粉虫体内获得N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAGase,EC3.2.1.52)研究VC、VB1、VB2、VB5、VB6、VB12等对黄粉虫NAGase活力的影响。结果表明:VC、VB1、VB6对NAGase起抑制作用;而VB5、VB2、VB12对NAGase的作用不明显。进一步研究VC和VB6的抑制作用动力学,结果表明:VC和VB6对酶的抑制作用可逆,VC为混合型抑制,VB6为非竞争型抑制。测得VC对酶的抑制常数KI与KIS分别为37.63mmol/L、95.64mmol/L;VB6对酶的抑制常数KI与KIS均为13.75mmol/L。     

金属离子对黄粉虫NAGase活力的影响

以黄粉虫为材料,以N-乙酰--βD-氨基葡萄糖苷酶(NAGase,EC 3.2.1.52)为研究对象.研究各种金属离子对NAGase酶活力的影响.结果表明,正一价碱金属Li 、Na 、K 等对酶活力基本上没有效应;Ca2 、Mg2 、Ba2 等碱土金属离子对酶活力也没有显著影响;而正三价金属离子Al3 和Fe3 、过渡金属离子Zn2 和Cd2 、重金属离子Cu2 、Ag 、Hg2 和Pb2 等对该酶活力均有不同程度的抑制作用.其中,Hg2 的抑制作用最为显著,2.5 mmol/L Hg2 可使酶活力完全丧失.进一步研究了Cu2 的抑制作用动力学,结果显示:Cu2 对酶的抑制作用为非竞争性可逆抑制,抑制常数KI=KIS=5.5 mmol/L.