Effect of interrupted endogenous BMP/Smad signaling on growth and steroidogenesis of porcine granulosa cells

Bone morphogenetic proteins (BMPs) play a critical role in the growth and steroidogenesis of granulosa cells (GCs). BMP signals act through membrane-bound heteromeric serine/threonine kinase receptors. Upon ligand binding, BMPs activate intracellular Smad proteins and regulate growth and apoptosis in various cell types. The objective of this study was to demonstrate the effects of BMP/Smad signal on growth and steroidogenesis of porcine GCs. A strategy of RNA interference (RNAi)-mediated ‘gene silencing’ of Smad4, a core molecule mediating the intracellular BMP/Smad signal transduction pathways, was used to interrupt endogenous BMP/Smad signaling. Results indicate that Smad4-small interfering RNA (siRNA) caused specific inhibition of Smad4 mRNA and protein expression after transfection. Interrupted endogenous BMP/Smad signaling significantly inhibited growth, and induced apoptosis of porcine GCs, while decreasing estradiol production. In addition, interrupted BMP/Smad signaling significantly (P<0.05) changed the expression of Cyclin D2, CDK4, Bcl-2, and Cyp19a1. These findings provide new insights into how BMP/Smad signaling regulates the growth and steroidogenesis of porcine GCs.     

RNAi的研究及应用

RNA干扰（RNA interference,RNAi）是由双链RNA（double-stranded RNA,dsRNA）引发的转录后基因沉默机制．RNAi可以调节和关闭基因的表达,进而调控细胞的各种高级生命活动,是真核生物中普遍存在的抵抗病毒入侵、抑制转座子活动、调控基因表达的监控机制．目前RNAi的研究取得了很大进展,有可能为肿瘤基因治疗提供新策略．     

RNAi的革命

通过实验手段向细胞内导入长的双链RNA或者转基因可以产生一些短片段的双链RNA,这些短片段的双链RNA可以通过促使特定基因的mRNA降解来高效、特异地阻断体内特定基因的表达,使细胞出现特定基因缺失的表型,称为RNA干扰(RNA interference,RNAi)。SiRNA(small interference RNA)就是这种短片段双链RNA分子,能够以序列同源互补的mRNA为靶目标,降解特定的mRNA。基本上所有的生物体内也都存在一种内源的小分子RNA,为单链RNA,由基因组转录生成,但是不编码蛋白质,它们的功能在于调节mRNA的翻译,称为miRNA,是由具有发夹结构的前体剪切产生的。RNAi的发现具有划时代的意义,它不仅揭示了细胞内基因沉默的机制,而且有望成为后基因组时代基因功能分析的有力工具,极大地促进了人类揭示生命奥秘的进程。     

RNA 干扰作用及其技术

RNA干扰作用(RNAi)是通过双链RNA介导的特异性转录后基因沉默，这一过程已在拟南芥、线虫和真菌等多种模式生物中得到揭示．RNAi主要通过双链RNA被核酸酶切割成的小干扰RNA(siRNA)，由siRNA介导识别并靶向切割同源靶mRNA分子而实现的．RNAi具有高效性和高特异性，已成为关闭基因的一项新技术，在基因功能研究和疾病的基因治疗中具有广阔的应用前景．     

认识小干扰RNA、微RNA和RNA干扰

近年来随着RNA干扰（RNAi）技术在生命领域的应用和小分子RNA研究的深入,RNA逐渐成为生命科学领域的一个研究热点。本文就RNA干扰技术及小干扰RNA（siRNA）和微RNA（m／RNA）间的关系进行了介绍。     

核糖核酸干扰及其应用研究进展

本文介绍了RNA干涉（RNAi）现象的发现过程、作用机理,以及RNAi在基因功能组学、遗传育种研究、重大传染病预防与治疗、恶性癌症的预防与治疗等方面所取得的重大成就。探讨了对RNAi技术进行深入研究的重大意义。     

RNAi的技术研究进展

RNA干扰是一些小的双链RNA可以高效、特异的阻断体内特定基因表达,促使mRNA降解,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型,也是体内抵御外在感染的一种重要保护机制。本文对RNA i的发现过程及作用机理进行了综述,本技术已经成为最近生物医学领域的焦点之一,将应用于基因功能和信号传导系统,上下游分子相互关系的研究可能为肿瘤基因治疗提供新的策略,在病毒性、寄生病原性、突变基因、癌基因和癌相关基因表达引起的疾病的基因治疗之中也有了新的突破。     

用于输送siRNA的聚乙烯亚胺-聚乙二醇二丙烯酸酯纳米凝胶

阐述了一种新的用于输送小干扰核糖核酸(siRNA)的聚乙烯亚胺-聚乙二醇二丙烯酸酯纳米凝胶的合成及其表征.在反相微乳液体系中,聚乙烯亚胺(PEI)和聚乙二醇二丙烯酸酯(PEG-DA)通过麦克尔加成交联得到纳米凝胶.1H-NMR和FTIR的结果充分证明纳米凝胶的化学结构,而动态光散射则表明纳米凝胶的颗粒粒径均匀,约为180 nm,zeta电位为37.9 mV.同时,MTT结果表明纳米凝胶在高达1 mg/mL的浓度下对MCF-7细胞也基本没有毒性.凝胶阻滞实验证明纳米凝胶在体外可以通过静电相互作用稳定结合siRNA.转染实验结果表明纳米凝胶与GFP siRNA的复合物能降低MCF-7 KMRV细胞(一种能稳定表达GFP蛋白的MCF-7细胞系)GFP蛋白的表达.以上结果证明这种生物相容性的纳米凝胶可以结合并输送siRNA进入细胞,沉默相关基因的表达.     

Fight plant pests using RNA interference

CAS plant physiologists have recently invented a plant-mediated RNA interference （RNAi） techniqueto effectively and specifically control the gene expression of the cotton bollworm （Helicoverpa armigera） and stunt its growth.Experts say that the feat marks a research breakthrough in the field of biotechnology for plant insect resistance,offering a novel strategy to fight plant pests.     

RNA干扰及其应用综述

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是真核生物中普遍存在的一种自然现象,是由双链RNA (double-stranded RNA,dsRNA)启动的序列特异的转录后基因沉默过程。在这一过程中,双链RNA被核酸内切酶切割成小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),小干扰RNA与相关的蛋白质结合成RNA 诱导沉默复合体(siRNA-induced silencing complex,RISC),RISC识别并降解靶mRNA。现在认为RNA 干扰是真核生物共有的抗病毒、抗转座子、抗转基因和抗异常RNA的基因组免疫系统。随着RNA干扰的研究,产生了一种新的技术——RNA干扰技术,并得到了广泛的应用。