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人类睾丸凋亡相关基因蛋白(TSARG2)在大肠杆菌中的表达和纯化
引用本文:邓云,聂东宋,卢光琇. 人类睾丸凋亡相关基因蛋白(TSARG2)在大肠杆菌中的表达和纯化[J]. 怀化学院学报, 2006, 25(8): 70-73
作者姓名:邓云  聂东宋  卢光琇
作者单位:人类干细胞国家工程研究中心,中南大学生殖与干细胞研究所,湖南,长沙,410078
基金项目:国家重点基础研究发展规划项目973课题:人类精子发生相关新基因的筛选及克隆(G1999055901).
摘    要:目的获得重组TsARG2基因蛋白,为进一步研究其功能和制备特异抗体奠定基础.方法根据已报道的TsARG2基因序列,采用RT-PCR的方法获得TsARG2基因.将所得的PCR产物插入原核表达载体pQE30中,得重组质粒(pQE/TSARG2)并转化大肠杆菌(E.coli)M15,通过IPTG诱导表达出带有六个组氨酸的融合蛋白,采用镍固定金属亲和层析法纯化.结果序列分析表明TSARG2基因成熟肽编码区含有918bp,编码305个氨基酸;与GenBank(AY040204)中已报道的TSARG2分离物的核苷酸序列有100%同源性.经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析显示,表达的融合蛋白占菌体蛋白总量的66%,分子质量约为35kDa.经Ni2 -NTAagarose纯化获得SDS-PAGE电泳下单一条带.结论在大肠杆菌中获得了TsARG2基因蛋白的高效表达,为研究其生物学功能和制备单克隆抗体奠定了基础.

关 键 词:TSARG2  表达与纯化  大肠杆菌
文章编号:1671-9743(2006)08-0070-04
收稿时间:2006-07-18
修稿时间:2006-07-18

Expression and Purification of Human Testis Spermatocyte Apoptosis-related Gene,Tsarg2 Protein in E.coli
DENG Yun,NIE Dong-song,LU Guang-xiu. Expression and Purification of Human Testis Spermatocyte Apoptosis-related Gene,Tsarg2 Protein in E.coli[J]. Journal of Huaihua University, 2006, 25(8): 70-73
Authors:DENG Yun  NIE Dong-song  LU Guang-xiu
Affiliation:Institute of Human Reproductive and Stem Cell Engineering; Central South University, Changsha, Hunan 410078
Abstract:
Keywords:TSARG2  expression and purification  E.coli
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