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水生植物凤眼莲Ca2+-ATPase的原核表达与蛋白纯化
引用本文:李裕红,吴文林,张鼐.水生植物凤眼莲Ca2+-ATPase的原核表达与蛋白纯化[J].泉州师范学院学报,2014(6).
作者姓名:李裕红  吴文林  张鼐
作者单位:1. 泉州师范学院 化学与生命科学学院,福建 泉州,362000
2. 厦门大学 医学院,福建 厦门,361005
基金项目:国家自然科学基金面上项目
摘    要:从水生植物凤眼莲叶片中提取总 RNA,经 RT-PCR扩增出Ca2+-ATPase基因片段,经限制性内切酶(Sma I,Not I)酶切后按正确的读码框顺序插入到pGEX-4T-2表达载体上,重组质粒转化大肠杆菌,经菌落PCR和质粒双酶切鉴定、序列测定确认,证实成功地构建了Ca2+-ATPase基因融合表达载体,.转化菌经IPTG诱导表达,获得了大小约48 kD的可溶性目的蛋白,与预期相吻合.利用谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B(Gluta-thione Sepharose 4B)亲和介质对重组蛋白进行纯化,获得了高纯度的目的蛋白.

关 键 词:凤眼莲  Ca2+-ATPase  原核表达  蛋白纯化

Prokaryotic Expression and Purification of Ca2+-ATPase from Aquatic Plant Eichhornia crassipes
LI You-hong,WU Wen-lin,ZHANG Nai.Prokaryotic Expression and Purification of Ca2+-ATPase from Aquatic Plant Eichhornia crassipes[J].Journal of Quanzhou Normal College,2014(6).
Authors:LI You-hong  WU Wen-lin  ZHANG Nai
Abstract:
Keywords:Eichhornia crassipes  Ca2+-ATPase  prokaryotic expression  protein purification
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