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| SOE-PCR二步法构建shRNA干扰质粒 | |
| 作者单位： | ;1.潍坊学院生物与农业工程学院;2.潍坊学院山东省高校生物化学与分子生物学重点实验室;3.潍坊学院化学化工与环境工程学院 |
| 摘 要： | 通过拼接重叠延伸PCR(SOE-PCR)二步法成功地建立了一种方便的shRNA干扰质粒的构建方法。将目的基因———半胱亚磺酸脱羧酶(CSD)特异性的shRNA序列用SOE-PCR二步法插入到pEGFP-H1-shRNA质粒中,经菌液PCR、酶切、测序鉴定,证明pEGFP-H1-CSD shRNA干扰质粒与预期结果一致,可以用于细胞转染和RNA干扰实验。采用本方法能快速、高效构建RNA干扰质粒,为研究基因功能提供帮助。 |
| 关 键 词： | SOE-PCR shRNA RNA干扰 半胱亚磺酸脱羧酶 |
Construction of shRNA Interference Plasmid by Two-step SOE-PCR |
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