四种大鼠星形胶质细胞原代纯化培养方法的比较

目的:寻求一种简单、经济、高效的大鼠大脑皮质星形胶质细胞原代纯化培养方法。方法:40只新生24小时Wistar大鼠,随机分成4组,每组10只。A组:酶消化、差速离心、振荡法;B组:酶消化、差速贴壁、恒温摇床法;C组:机械吹打、差速贴壁、恒温摇床法;D组:D1机械处理、差速贴壁、恒温摇床法D2酶消化、差速离心、振荡法。结果:四组纯化培养出的细胞都具有典型胶质细胞形态学星形特征。经GFAP-FITC免疫荧光结合DAPI染色鉴定纯度A:97.8%B:95.5%C:96.3%D组:(D1:95.7%;D2:97.3%);细胞数量D组A组B组C组。结论:四组方法提取的细胞纯度均达95%以上,均能达到细胞实验的要求,C组方法提取所得细胞纯度最高,操作简单,细胞数也较多,值得推广。D组方法提取得到的细胞最多,虽过程相对繁琐,但也是一种值得推广的星形胶质细胞提取方法。