| 摘 要： | 本研究实验一采用三种添加不同浓度蔗糖的预处理液(S1,S2,S3)分别处理小鼠卵母细胞20mim,以PBS溶液或0.5mol/L蔗糖溶液脱除抗冻保护剂,统计卵母细胞的存活率.S1液为含10%v/v的PBS溶液;S2液在S1液的基础上蔗糖浓度添加至0.034mol/L;S3液在S1液的基础上蔗糖浓度添加至0.38mol/L.结果显示:以PBS液直接脱除抗冻保护剂,S1,S2,S3组卵母细胞的存活率分别为0,20%,54%.以0.5mol/L的蔗糖溶液脱除抗冻保护剂,S1,S2,S3组卵母细胞存活率分别为43%,50%,75%.实验二所有卵母细胞以S1液预处理3min,然后分别以ES1,ES2,ES3液处理30s,采用PBS,0.25mol/L或0.5mol/L蔗糖溶液脱除抗冻保护剂.ES1液为40%v/v的EG溶液中添加了0.3mol/L的蔗糖;ES2液的蔗糖浓度为0.5mol/L;ES3液的蔗糖浓度为0.8mol/L.结果显示,随着蔗糖浓度的提高,卵母细胞以PBS脱除抗冻保护剂的存活率显著提高(ES3组57%vs ES1组3%).该研究表明,预处理液或玻璃化液中添加蔗糖,均能影响卵母细胞脱除抗冻保护剂的方法.结论 ,在卵母细胞冷冻实验中,应根据冷冻液的成分设计相应的抗冻保护剂脱除方法.
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