应用PCR技术检测哮喘5-LO E254K突变基因效果探析 |
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作者姓名: | 吴晓东 |
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作者单位: | 赤峰学院 医学院,内蒙古 赤峰,024000 |
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摘 要: | 目前研究发现人类的花生四烯酸代谢途径中5-脂氧合酶的第254位氨基酸发生一定突变后,此人一般为过敏体质,易患哮喘.本文介绍一种快速简便检测哮喘患者5-LO E254K突变基因的方法及详细步骤.方法:采2ml 外周血,用0.2%氯化钠处理收集白细胞,再用基因组DNA提取试剂盒抽提基因组DNA,用等位基因特异性PCR(AS-PCR)法直接对E254K多态性进行扩增分型.结果:用该方法检测5-脂氧合酶E254K多态性结果准确清晰.结论:用我们设计的引物可以对5-脂氧合酶E254K多态性直接扩增分型,跟测序法和限制性内切酶酶切法相比,具有经济、快速、简便、易行等特点.
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关 键 词: | 等位基因特异性PCR 哮喘 5-脂氧合酶 单核苷酸多态性 |
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