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可视化LAMP鉴定冬虫夏草方法的研究
摘    要:为建立可视化环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)鉴定冬虫夏草的方法,根据冬虫夏草csp2(serine protease-2)基因设计引物,采用CTAB法提取亚香棒虫草,古尼虫草和冬虫夏草的基因组DNA.并在LAMP反应体系优化的基础上,进行特异性和灵敏度检测.在LAMP产物中加入CuSO_4或SYBR Green Ⅰ核酸染料.结果表明,经优化最适反应温度为65℃,最佳反应时间为60 min.电泳结果显示,该法可特异性检测出虫草真伪,其灵敏度检测限为6.34 pg/mL.反应结束后,添加SYBR Green Ⅰ,在紫外灯下进行观察阳性管呈明显的绿色荧光.加CuSO_4后,在可见光下进行观察,阴性管中有蓝色环状沉淀.因此,本研究建立的可视化LAMP为鉴定冬虫夏草真伪提供了一种参考方法.

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