Asia Ⅰ型口蹄疫病毒VP1基因C末端在大肠杆菌中的表达与纯化 |
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作者姓名: | 韩建成 王保海 刘晃 曾江勇 王宝闯 |
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作者单位: | 1. 西藏自治区畜牧兽医研究所,西藏,拉萨,850009 2. 西藏自治区农科院,西藏,拉萨,850009 |
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摘 要: | 本试验用VP1基因C末端与表达载体连接,转化到大肠杆菌中,经IPTG诱导表达,收集不同时间段的菌液进行SDS-PAGE,结果表明重组的VP1基因C末端蛋白在大肠杆菌中能高效表达,表达的目的蛋白分子量约为16kd,而且重组菌诱导裂解物可在16kd处看到一条特异的蛋白条带,与预期大小一致,阴性对照未出现表达条带,而且重组菌在IPTG终浓度为1mmoL/L诱导6 h时表达量最大。表达产物主要以包涵体的形式存在,提取和裂解包涵体后,进一步纯化表达的目的蛋白,可获得纯度达70%以上的目的蛋白。
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关 键 词: | Asia Ⅰ型口蹄疫病毒 VP1基因C末端 诱导表达 纯化 |
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