T7E1检测CRISPR-Cas9基因编辑效果实验设计 |
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引用本文: | 王宏刚魏远李艳君朱玉山.T7E1检测CRISPR-Cas9基因编辑效果实验设计[J].实验技术与管理,2023(5):38-41. |
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作者姓名: | 王宏刚魏远李艳君朱玉山 |
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作者单位: | 1.南开大学生物国家级实验教学示范中心300071; |
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基金项目: | 2020年天津市高等学校本科教学质量与教学改革研究计划项目(B201005506)。 |
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摘 要: | CRISPR-Cas9是一种现代生命科学研究中普遍使用的新型基因编辑技术。为了升级课程内容体系,使实验教学贴近科研实际,提升实验课程教学质量,设计了T7核酸内切酶1(T7E1)检测CRISPR-Cas9基因编辑效果实验。以CRISPR-Cas9基因编辑技术对mfn1编辑过的HeLa细胞为实验材料,提取基因组DNA,PCR扩增mfn1基因片段,切胶回收后,变性,退火,使用T7E1对编辑效果进行检测。经1%琼脂糖凝胶电泳,可观察到T7E1将略大于500 bp的mfn1基因片段切成两条大小约为250 bp的DNA片段,表明CRISPR-Cas9成功地对mfn1进行了编辑。
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关 键 词: | T7核酸内切酶1 CRISPR-Cas9 实验教学 科研反哺教学 |
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