滇池微囊藻毒素对小鼠肾脏的毒性研究

为了探索滇池微囊藻毒素对小鼠肾脏的损伤作用,以滇池水华水样提取微囊藻毒素对小鼠进行连续灌胃,然后取其。肾组织石蜡包埋、HE染色后对小鼠肾脏组织进行显微结构观察．结果显示,小鼠肾脏形态未见明显异常,但肾小管因细胞脱落而结构不完整,细胞间隙有炎症细胞浸润．表明肾脏可能是微囊藻毒素的靶器官,微囊藻毒素通过破坏肾单位的结构,影响其生理功能．     

重楼皂苷对微囊藻毒素致小鼠肝损伤保护作用的组织学研究

试验用重楼薯蓣皂苷(SY)和偏诺皂苷(PN)对微囊藻毒素浸染的小鼠进行连续灌胃,并通过对小鼠肝脏进行石蜡包埋、制片和HE染色,观察小鼠肝组织的显微结构,目的在于研究重楼皂苷类化合物对微囊藻毒素(MC)所致肝损伤的保护作用.结果显示,微囊藻毒素具有肝毒性,致肝小叶结构严重破坏,而重楼薯蓣皂苷和偏诺皂苷对微囊藻毒素所致的肝损伤均有保护作用.     

湿地内外滇池水体中微囊藻毒素对小鼠生殖毒性的研究

通过提取湿地内外滇池水体水样中的微囊藻毒素,检测湿地内外水体中微囊藻毒素对小鼠的生殖毒性,以及对其体外和体内精子活性的影响.结果表明：湿地外周滇池水体中的微囊藻毒素对小鼠具有生殖毒性,特别在精子的生成和精子活性方面表现出较强的毒性作用;湿地内水体的生殖毒性明显低于湿地外水体,对小鼠的睾丸和附睾不会形成器质性变化,也不会影响精子的数量和精子活性（与对照组比较P〉0.05）.结果证实湿地能有效抑制滇池水体中微囊藻毒素的形成,对滇池水质可起到有效的净化作用.     

经湿地净化后滇池水体中微囊藻毒素的毒性变化

采集滇池水华及湿地水体水样进行微囊藻毒素的提取,通过急性毒性和长期毒性试验,检测经湿地净化后水体和滇池水华水体中微囊藻毒素对动物的影响.比较得知,滇池水华水体中的毒素浓度较高,为高毒水体;湿地外周水体毒素提取液的毒性较水华水体低得多,为有害水体;而湿地净化水体毒素提取液则表现为无毒性.结果表明,湿地对滇池水体的净化具有明显作用,对滇池水生生物及周边动物及人类健康具有良好的保护作用.     

猞猁和豹猫肝脏结构的观察比较及AQP-8在肝脏中的表达

利用生物显微技术对猞猁(Felis lynx)和豹猫(Prionailurus bengalensis)肝脏进行了比较,应用免疫组织化学方法检测了水通道蛋白-8(AQP-8)在肝脏中的表达情况.结果显示,与多数哺乳类相似,猞猁和豹猫的肝脏外被覆一层结缔组织薄膜,肝小叶的界限不清楚,中央静脉周围放射状排列着肝板、肝血窦及狄氏间隙,单层排肝细胞构成肝板,在门管区可清晰观察到小叶间静脉、小叶间动脉和小叶间胆管豹猫肝小叶的肝细胞排列较猞猁的规则,但肝细胞的直径较猞猁的小.猞猁肝细胞间比较松散,肝血窦较豹猫的发达.猞猁肝脏AQP-8的表达较豹猫的强烈.结果表明,猞猁和豹猫肝脏的组织结构及肝脏AQP-8在肝脏的表达与其生活习性相适应.     

一种小鼠原代肝细胞的分离与培养方法

目的:探索一种高效、稳定的小鼠原代肝细胞分离方法,并延长其体外培养的时间。方法:取成年雄性C57BL/6小鼠,以含双抗的D-Hanks灌流液经肝门静脉充分灌注肝脏,然后以0.2 mg/mL的Ⅳ型胶原酶灌注消化,接着过滤、离心、洗涤,获得小鼠原代肝细胞。通过台盼蓝染色检验小鼠原代肝细胞活率,利用倒置显微镜观察肝细胞的形态变化,糖原染色鉴定细胞纯度,添加ITS-X和HGF细胞因子延长小鼠原代肝细胞的体外培养时间。结果:平均每只成年小鼠肝脏可提取获得原代肝细胞约2×107个,台盼蓝染色显示细胞活率均超过95%,糖原染色结果表明此方法获得的原代肝细胞纯度高于95%,通过添加HGF和ITS-X两种细胞因子能够有效地延长肝细胞形态的体外维持时间。结论:本实验在原有小鼠原代肝细胞两步灌流分离法和培养的基础上,经过优化,成功建立了一种高效、稳定的小鼠原代肝细胞分离和培养方法,为肝脏的体外研究提供了技术保障。     

太湖土著菌MC-LTH11的筛选及其对藻毒素-RR和-LR的生物降解(英文)

从太湖中成功筛选出一株能够同时降解微囊藻毒素-RR(MC-RR)和微囊藻毒素-LR(MC-LR)的土著细菌MC-LTH11.经鉴定,该菌属寡养单胞菌属,并含有mlrA基因.在含有藻毒素粗提物的培养基中,MCLTH11能够在6 d内将初浓度分别为37.13 mg/L的MC-RR和18.49 mg/L的MC-LR完全降解,并且降解速度受到pH值、温度、初始微囊藻毒素浓度和培养基种类的影响.此外,MC-LTH11能够在1 d内完全降解太湖水样中的微囊藻毒素.研究结果表明,寡养单胞菌MC-LTH11具备对微囊藻毒素污染水体的修复能力,并可能是太湖水华爆发后微囊藻毒素降解的重要因素.     

水产品中微囊藻毒素的检测方法研究

采用富集微囊藻毒素的黑色大头鲢鱼为样品,对微囊藻毒素（microcystin-RR-,-LR）的提取、纯化和HPLC检测方法进行研究.实验建立了固相萃取（SPE）结合高效液相色谱（HPLC）分析水产品中痕量微囊藻毒素的方法,利用二极管阵列检测器在238nm进行检测.其中,微囊藻毒素的提取溶剂分别为5%乙酸、75%甲醇和正丁醇-甲醇-水溶液（1∶4∶15）,80%甲醇为洗脱溶剂.HPLC检测中的流动相为含微量三氟乙酸的55%甲醇溶液.研究结果表明,MC-RR的回收率为84.1%,MC-LR的回收率为89.9%.该法具有操作简便、灵敏度高、方法稳定的特点,适用于快速分析环境产品中的两种常见微囊藻毒素MC-LR和MC-RR.     

太湖南泉水域产毒微囊藻环境丰度和微囊藻毒素-LR产毒能力（英文）

采用实时荧光定量PCR和高效液相色谱技术对太湖南泉水域2009年5月至12月产毒微囊藻的环境丰度及其微囊藻毒素-LR产毒能力进行研究,并监测水质和富营养化程度.研究结果表明：南泉水域的水污染程度与富营养化程度均为中度;5月至11月蓝藻密度均超过水华的阈值;5月至10月产毒微囊藻的环境丰度均高于40%,随着温度的降低,产毒微囊藻的环境丰度迅速降低并在12月降到了5.66%;5月至12月产毒微囊藻的微囊藻毒素-LR产毒能力为1.661～9.293μg/亿细胞.11月至12月随着水温和藻密度的急速下降,产毒微囊藻的微囊藻毒素-LR产毒能力显著增强.结果提示太湖南泉水域全年大部分时间存在水华,产毒微囊藻为其优势藻,产毒微囊藻的环境丰度及其微囊藻毒素-LR产毒能力的动态变化和水温密切相关.冬季产毒微囊藻产毒能力的显著增强也提示在水华和非水华期内对其防制都应予以重视.     

海鳗肝脏的组织学研究

采用光镜技术研究海鳗肝脏的显微结构，结果表明：海鳗肝内结缔组织较少，肝小叶不明显．中央静脉不规则，肝细胞索单行或双行以中央静脉为中心呈放射状排列，肝血窦不规则．肝门管区不典型，仍可找到伴行的小叶间动脉、小叶问静脉和小叶间胆管．肝细胞较大，呈多边形，细胞间分界明显．细胞质丰富，细胞核为圆形或卵圆形，可见双核。     

三叶悬钩子对大鼠酒精性肝炎保护作用

目的：：观察三叶悬钩子乙醇提取物对大鼠酒精性肝炎的保护作用。方法：90只大鼠,随机分为6组,每天上午8：00灌胃1次,正常组大鼠灌胃给蒸馏水,其余5组大鼠灌胃给白酒,连续灌胃28 d,建立大鼠酒精性肝炎模型;第15天开始,每天上午9：00各组大鼠均以相应药物灌胃1次,连续灌胃14 d;第28天末次灌胃后,取血、取肝脏,检测血清天门冬氨酸氨基转移酶（GOT）、丙氨酸氨基转移酶（GPT）活性及肝组织丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性;观察肝脏指数及肝组织病理变化。结果：三叶悬钩子乙醇提取物能显著降低肝炎大鼠GPT、GOT活性和MDA含量,能显著提高肝炎大鼠SOD活性;能显著降低肝炎大鼠肝脏指数;能显著减轻肝炎大鼠肝组织水肿和脂肪变性。结论：三叶悬钩子对大鼠酒精性肝炎有保护作用。     

液态甲醛诱导小鼠肝损伤及纤维化研究

建立液态甲醛诱导小鼠肝损伤及其纤维化模型,并初步观察小鼠肝组织的病变过程．将正常昆明小鼠随机分为实验组和对照组．实验组小鼠注射15％的甲醛溶液,注射量为1mL／kg,每周注射两次,并且每天用1％的甲醛溶液喂养．对照组小鼠以纯净水正常喂养,分别在实验开始后的第3、6、8周处死实验组小鼠各4只,肉眼及病理切片观察其肝脏形态的改变,发现小鼠的体重均呈增长趋势．与实验组小鼠比较,对照组小鼠体重增长显著（P〈0．05）．第8周小鼠肝脏出现明显的病变,表面粗糙,颜色暗黄,出现深色斑点．在石蜡切片中可观察到肝脏组织变得松散,窦周隙（Disse’s space）增大．肝星状细胞（hepatic stellate cell,HSC）较对照组明显增多．随着甲醛处理时间的延长,HSC不同程度地增多,肝损伤病变程度越来越严重．     

白芍总甙对大鼠酒精性肝损伤保护作用的实验研究

目的：探讨白芍总甙对实验性大鼠酒精性肝损伤的保护作用及其作用机制。方法：SD大鼠随机分为3组：模型组（M组）、生理盐水对照组（N组）、白芍总甙处理组（B组）,每组10只。M组大鼠予56°白酒连续灌胃4周制造酒精性肝损伤模型;B组在白酒灌胃基础上给予白芍总甙0．4mg／100g体重灌胃;N组予生理盐水灌胃。第4周末处死大鼠后检测血清ALT、AST、γ-GT、SOD、MDA水平,光镜下观察肝组织细胞形态学改变,用免疫组化方法测定肝细胞核中NF-κB的表达。结果：模型组大鼠血清ALT、AST、γ-GT、MDA水平明显升高;白芍总甙处理组大鼠血清ALT、AST、γ-GT、MDA轻度升高,但明显低于模型组,与生理盐水对照组相比无显著性差异。模型组大鼠血清SOD水平明显降低,白芍总甙处理组与生理盐水对照组血清SOD水平明显高于模型组。模型组肝细胞脂肪变性、坏死、炎性细胞浸润等改变均较白芍总甙处理组及对照组明显。白芍总甙处理组NF-κB的表达低于模型组。结论：白芍能改善肝功能,对实验性大鼠酒精性肝损伤具有保护作用,其机制可能与降低脂质过氧化水平,提高抗氧化酶活性,抑制NF-κB的活化有关。     

Impairment of liver regeneration by the histone deacetylase inhibitor valproic acid in mice

Background and objective: Liver regeneration is a complex process regulated by a group of genetic and epigenetic factors. A variety of genetic factors have been reported, whereas few investigations have focused on epigenetic regulation during liver regeneration. In the present study, valproic acid (VPA), a histone deacetylase (HDAC) inhibitor, was used to investigate the effect of HDAC on liver regeneration. Methods: VPA was administered via intraperitoneal injection to 2/3 partially hepatectomized mice to detect hepatocyte proliferation during liver regeneration. The mice were sacrificed, and their liver tissues were harvested at sequential time points from 0 to 168 h after treatment. DNA synthesis was detected via a BrdU assay, and cell proliferation was tested using Ki-67. The expressions of cyclin D1, cyclin E, cyclin dependent kinase 2 (CDK2), and CDK4 were detected by Western blot analysis. Chromatin immunoprecipitation (ChIP) assay was used to examine the recruitment of HDACs to the target promoter regions and the expression of the target gene was detected by Western blot. Results: Immunohistochemical analysis showed that cells positive for BrdU and Ki-67 decreased, and the peak of BrdU was delayed in the VPA-administered mice. Consistently, cyclin D1 expression was also delayed. We identified B-myc as a target gene of HDACs by complementary DNA (cDNA) microarray. The expression of B-myc increased in the VPA-administered mice after hepatectomy (PH). The ChIP assay confirmed the presence of HDACs at the B-myc promoter. Conclusions: HDAC activities are essential for liver regeneration. Inhibiting HDAC activities delays liver regeneration and induces liver cell cycle arrest, thereby causing an anti-proliferative effect on liver regeneration.     

重楼皂苷类化合物对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

将重楼皂苷类化合物PHAC-A和PHAC-B配制为高、低质量浓度组,以灌胃方式连续给药7 d,测定小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数.结果显示,PHAC-A,PHAC-B高、低质量浓度组对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数的影响均高于对照组和阳性对照组（P〈0.05）;两组比较,PHAC-A对巨噬细胞吞噬功能的促进作用明显高于PHAC-B.结果表明,重楼皂苷类化合物对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能具有明显促进作用,并以PHAC-A的作用最强.     

急性铅中毒对小鼠睾丸病理损伤研究

为了研究急性铅中毒对小鼠睾丸病理变化的影响,通过对小鼠饲喂含有醋酸铅的去离子水建立铅负荷小鼠模型.处理10 d后取材,分析体质量、睾丸指数和睾丸病理剖检变化.结果显示：与对照组相比,铅中毒组小鼠体质量无明显变化,睾丸指数降低,且差异显著（P＜0.05）;小鼠睾丸中支持细胞、生精细胞和间质细胞数量减少.铅对小鼠睾丸具有显著损害作用,从而影响小鼠的生殖健康.     

rhEPO和睾酮对低氧小鼠血清ASTase、ALTase、LDHase活性抑制效应

目的观察ｒｈＥＰＯ和睾酮对低氧小鼠血清ＡＳＴａｓｅ、ＡＬＴａｓｅ、ＬＤＨａｓｅ活性的影响．方法应用低压舱小鼠实验（０．４２ａｔｍ,２２ｈ／ｄ, ６ｄａｙｓ）,分别注射ｒｈＥＰＯ（２００ｕ／ｋｇ·ｄ）、宰酮（２．５ ｍｇ／ｄ）、皮质醇（０．５ ｍｇ／ｄ）,检测血清酶活性、血清 ＥＰＯ浓度和 Ｈｃｔ．结果ｒｈＥＰＯ和睾酮不同程度地抑制低氧小鼠血清酶活性．结论ｒｈＥＰＯ和睾酮对低氧动物肝功能具有不同程度地保护效应。     

Hypothetical mode of action of earthworm extract with hepatoprotective and antioxidant properties

The hepatoprotective potential of earthworm extract (EE) (Lampito mauritii, Kinberg) was evaluated against paracetamol-induced liver injury in Wistar albino rat, in comparison with silymarin, the standard hepatoprotective drug. We observed a reduction in liver antioxidants, such as glutathione (GSH), superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GPx),and catalase (CAT) and in serum total protein, and an increase in serum alkaline phosphatase (ALP), serum aspertate aminotranferase (AST), serum alanine aminotranferase (ALT), bilirubin and liver thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) due to liver injury in the paracetamol-administered rats (2 g/kg). On the contrary, increased activities of liver GSH, SOD, GPx,CAT and serum total protein level, and decrease in the contents of serum ALP, AST, ALT, bilirubin and liver TBARS were observed in rats administered with different doses of EE (100, 200 and 300 mg/kg), which are similar to the activities of hepatoprotective drug silymarin (150 mg/kg). The mode of action of EE as evidenced by the above parameters may suggest that EE, on the one hand, prevents the formation of the reactive oxygen groups, or scavenges these groups, thereby preventing the damage on the hepatic cells, and, on the other hand, modulates the genes responsible for synthesis of antioxidant enzymes such as GPx, CAT and SOD in liver tissue and decreases the serum enzymatic activities such as ALP, AST and ALT.