Bmi-1-siRNA对肺腺癌A549细胞迁移和转移的影响

观察Bmi-1基因沉默对A549细胞体外迁移和体内转移的影响。设计针对Bmi-1的小干扰RNA(siRNA)序列作为靶序列构建重组逆转录病毒siRNA表达载体并将其转染入肺腺癌A549细胞;应用RT-PCR和Western Blot方法检测对Bmi-1基因的沉默效果;应用划痕修复和Transwell方法检测Bmi-1-siRNA对A549细胞体外迁移的影响;通过裸鼠尾输入各组细胞,观察Bmi-1-siRNA对A549细胞在裸鼠体内转移能力的影响。结果显示:沉默Bmi-1基因的表达能够抑制A549细胞的体内外迁移能力,同时降低VEGF的分泌。Bmi-1-siRNA能抑制肺腺癌A549细胞的转移能力,VEGF可能参与其中。     

支原体污染通过耗竭L-精氨酸降低HEK-293细胞中质粒DNA转染效率（英文）

目的:明确支原体污染对HEK-293细胞质粒DNA转染效率的影响,并从支原体对细胞精氨酸代谢的角度探究其机制。创新点:支原体是细胞培养中的常见污染源。HEK-293是目前常用的生产蛋白、包装病毒的常用细胞系。然而,目前支原体污染对于质粒DNA转染效率的影响未见报道。本研究首次报道支原体污染对HEK-293细胞质粒DNA转染效率的影响,并揭示其机理。方法:采用4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)和聚合酶链反应(PCR)方法鉴定HEK-293细胞中的支原体污染情况以及支原体抗生素Plasmocin对支原体污染的清除效果。通过聚乙烯亚胺(PEI)方法对支原体污染的HEK-293细胞及支原体清除后的HEK-293细胞转染质粒,比较转染效率差异。通过高效液相色谱法(HPLC)分析支原体污染的和支原体清除后的HEK-293细胞的细胞裂解产物和细胞上清中的L-精氨酸、瓜氨酸含量变化。在支原体污染的HEK-293细胞中补充L-精氨酸,观察质粒转染效率的改变情况。结论:支原体污染能大大降低HEK-293细胞中质粒DNA的转染效率,且其原因与支原体能耗竭细胞中的L-精氨酸有关。     

素质教育舞蹈在高校公共体育舞蹈教学中的运用研究——以百色学院为例

目的:观察探讨C35在肝癌中的表达与靶向干预,为临床治疗提供依据。方法:设计两对C35编码区的si RNA并合成,构建到转录载体p TZU6+1上,形成重组质粒siRNA-C35,在脂质体介导下转染肝癌细胞株,RT-PCR分析RNA干扰后mRNA的变化,Western blot检测表达蛋白的变化。结果:扩增的目的基因条带亮度存在明显差异,与对照组相比,转染质粒pTZU6+1相对表达率为95.3%、siRNA1组相对表达率为40.0%,siRNA2组的相对表达率为28.4%。构建的重组质粒对C35mRNA的表达有抑制作用。只转染脂质体组和pTZU6+1的C35蛋白杂交带强于siRNA1和siRNA2,证实重组质粒可以抑制C35基因的表达,以对照组的蛋白带为标准,其图像分析可知,转染质粒pTZU6+1相对表达率为94.9%、siRNA1组相对表达率为29.6%,siRNA2组的相对表达率为32.2%。结论:通过设计C35基因敲除的si RNA可有效抑制C35基因的表达,肝癌细胞生长速度及侵袭性均发生改变,但C35基因在肝癌细胞株中及肝癌组织中低表达,不可作为肝癌的靶点干预基因。     

人核糖核酸酶抑制因子siRNA慢病毒载体的构建及鉴定

本实验旨在构建人核糖核酸酶抑制因子稳定干涉载体pLKO.1-ds RI,为后续观测人核糖核酸酶抑制因子干涉载体的表达对肿瘤细胞的影响奠定基础。用亚克隆法,将针对人核糖核酸酶抑制因子的干涉片段从Simple T-ds RI质粒克隆到pLK-0.1-TRC质粒,用酶切法筛选得到阳性重组质粒pLKO.1-ds RI,用测序法鉴定克隆序列正确。转染时设干扰组、空载体组和空白组三组,每组三次重复。用脂质体Cellfectin^R将pLKO.1-ds RI(干扰组)、pLKO.1-TRC(空载体组)转染进人肝癌细胞HepG2细胞中,未处理的细胞作空白组。转染后72hr用Western blotting检测细胞中核糖核酸酶抑制因子表达的变化。双酶切鉴定及测序鉴定结果均正确;Western blotting结果表明,对比空白组(1.1578±0.015)和空载体组(1.1216±0.027),干扰组RI表达(0.6119±0.048)明显下调(P<0.05)。结果表明人核糖核酸酶抑制因子干涉载体pLKO.1-ds RNH1构建成功。     

网络图书管理系统及其关键技木探讨

目的:探讨腹腔镜术后联合应用促性腺激素释放激素激动剂(Gn RH-a)和孕三烯酮巩固治疗子宫内膜异位症患者的临床效果,并分析其对患者卵巢功能及复发和再次妊娠的影响。方法:选取2012年1月-2014年3月在本院妇产科行腹腔镜手术治疗的子宫内膜异位症患者164例,按随机数字表法分为四组,分别为联合组38例(术后应用Gn RH-a联合孕三烯酮治疗),Gn RH-a组43例(术后仅应用Gn RH-a治疗),孕三烯酮组47例(术后仅应用孕三烯酮治疗),对照组36例(术后应用安慰剂治疗)。比较四组的症状缓解情况、用药前后性激素水平的变化、复发及再次妊娠情况。结果:联合组、Gn RH-a组、孕三烯酮组患者症状明显缓解率比较差异均无统计学意义(P>0.05),但三组均明显高于对照组,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);联合组、Gn RH-a组、孕三烯酮组用药治疗后血清雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)、卵泡生成素(FSH)均较治疗前明显降低,治疗前后比较差异均有统计学意义(P<0.05),联合组、Gn RH-a组上述血清性激素水平下降幅度比较差异无统计学意义(P>0.05),但均明显小于孕三烯酮组,差异有统计学意义(P<0.05);联合组、Gn RH-a组、孕三烯酮组随访期间累计复发率比较差异均无统计学意义(P>0.05),但均明显低于对照组,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);联合组、Gn RH-a组、孕三烯酮组妊娠率及良好妊娠结局率均明显高于对照组,三组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);联合组与Gn RH-a组妊娠率及良好妊娠结局率比较差异无统计学意义(P>0.05),但均明显高于孕三烯酮组,两组与孕三烯酮组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:腹腔镜术后应用Gn RH-a联合孕三烯酮治疗与单用Gn RH-a和孕三烯酮临床疗效及预防复发效果相当,对卵巢功能的影响和促进良好妊娠结局的效果与单用Gn RH-a相当,但优于单用孕三烯酮。     

翻白草油对肝癌HepG2细胞迁移和侵袭能力的影响

目的:探讨翻白草油对Hep G2肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响.方法:实验设立对照组和翻白草油组.细胞划痕实验及体外Transwell小室实验观察Hep G2细胞的迁移和侵袭能力.结果:划痕实验结果表明翻白草油组细胞迁移的距离短于对照组(P0.05).体外Transwell小室实验结果表明翻白草油组侵袭的细胞数量少于对照组(P0.05).结论:翻白草油抑制肝癌细胞的迁移和侵袭.     

橄榄苦苷对肝癌HepG2细胞迁移和侵袭能力的影响

目的:探讨橄榄苦苷对HepG2人肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法:实验设立对照组和橄榄苦苷组。细胞划痕实验及体外Transwell小室实验观察HepG2细胞的迁移和侵袭能力。结果:划痕实验结果表明橄榄苦苷组细胞迁移的距离短于对照组(P0.05)。体外Transwell小室实验结果表明橄榄苦苷组侵袭的细胞数量少于对照组(P0.05)。结论:橄榄苦苷抑制肝癌细胞的迁移和侵袭。     

创设情境,让语文课堂诗意流淌——儿童诗《风》教学策略

目的:分析集束化护理在降低胸腰骶骨折术后患者腹胀便秘发生率的效果。方法:将2015年2月-2016年9月至本院骨科胸腰骶骨折进行手术治疗的患者93例作为研究对象,所有患者均符合试验标准且自愿参与。运用摸球法分为对照组46例和试验组47例。对照组施以常规护理,试验组在对照组基础上加以实施集束化护理。比较并评估两组术后腹胀便秘发生情况及满意度情况。结果:试验组无腹胀率为89.36%,高于对照组的65.22%,差异有统计学意义(P<0.05);且两组轻度腹胀者数量比较,差异也有统计学意义(P<0.05);两组中度及重度腹胀者比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。试验组首次排便时间为(15.21±3.13)h,短于对照组的(27.15±4.93)h,差异有统计学意义(P<0.05);试验组肠鸣音(5.41±0.35)次/min,对照组(3.08±0.31)次/min,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);试验组持续腹胀时间为(2.19±0.93)h,短于对照组(4.62±1.29)h,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组满意度为93.62%,高于对照组的71.74%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:运用集束化护理能够有效减少胸腰椎患者术后的腹胀便秘发生率,提高患者满意度。     

微课结合传统教学法在临床护理教学中的应用及效果

目的:本实验的课题主要探讨了微课结合传统教学法在临床护理教学中的应用效果。方法:先根据随机数字法对本院2015年2月—2017年3月期间的80例本科室实习护生进行分组,40例实验组护生采用微课结合的传统教学法,40例对照组护生采用传统教学法,对比两组护生理论考试成绩与实践考试成绩,同时对比两组护生的学习能力。结果:实验组护生在理论考试与实践考试成绩中均优于对照组,组间差异具有统计学意义(P<0.05);实验组护生的学习兴趣、学习效率、自主学习能力以及理解记忆力均优于对照组,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:微课结合传统教学法在临床护理教学中具有良好的应用效果,能够有效提高学生的学习能力与考试成绩,具有较高的推广价值。     

参附汤对心脏毒性损伤大鼠细胞凋亡相关基因的影响

探讨参附汤对阿霉素心脏毒性损伤大鼠细胞凋亡相关基因转录水平的影响。采用实时荧光定量PCR法测定大鼠心肌组织Bax、Bcl-2和Caspase-3 m RNA的转录水平。结果表明,阿霉素心脏毒性损伤模型大鼠与对照组相比,Bax和Caspase-3 m RNA的转录水平均提高,而Bcl-2 m RNA的转录水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。参附汤组与模型组相比,Bax和Caspase-3 m RNA的转录水平均降低,而Bcl-2 m RNA的转录水平提高,差异有统计学意义(P<0.05)。阿霉素心脏毒性损伤与心肌细胞凋亡有关,参附汤通过调节细胞凋亡相关基因表达水平来改善心肌毒性损伤,达到保护心肌的功能。     

试论天性学习与规定性学习

探讨学习的两种性质：天性学习和规定性学习为研究起点,分析两种学习认识的异同和产生的作用,试图从二者的集合相生作用中找出对教育异化现象的解释和解决思路。     

一路走着,读着……

在最后一场雪纷纷扬扬时,我们的小学青年教师教学理论读书班,正春意盎然地进行着。拿起苏霍姆林斯基《给教师的建议》轻轻地抚摩,爱不释手,因为它有一种积淀了丰富教育思想的厚重感;翻开施良方先生的《教学理论》、《学习论》, 高屋建瓴的理论框架也曾让我望而生畏;《新课程标     

论赖尔的行为主义身心观

分析哲学家赖尔批判了笛卡尔的身心二元论,否认了独立的心的存在,将心灵还原为行为,具有一定理论价值,但同时也面临方法论和本体论上的困难。由于其包含了物理主义的本体论,故成为一种＂无头脑＂的心理学。行为主义如何对待精神存在的事实？这也正是唯物主义必须直面的问题。     

论后悔对人格发展的影响——基于埃里克森理论

埃里克森将人格发展视为自我调整顺利度过每个阶段的"危机",实现每个阶段的"平衡"。后悔往往伴随消极的情绪体验,与内部"不平衡"状态联系紧密,是人格发展需要处理的任务。接受后悔的程度、自我调整以及年龄差异影响个体的生活状态。适应和接受人生后悔经历对人最终实现人格自我完善具有重要意义。     

网络与未成年人健康成长之思考

未成年人正成为网络用户中的一支不容忽视的群体.网络的"双刃剑"作用明显,特别是网络对未成年人的负面影响引起了全社会的关注.加强网络管理,提供健康文明的网络环境.推进网络德育,提高未成年人的免疫力.社会、学校、家庭密切配合,让网络成为他们的良师益友,促进未成年人健康成长.     

对赫尔巴特学生观的再认识

赫尔巴特主张在教学中和教学外都要给予学生最大程度的自由,但又反对教育者对学生放任自流。在对学生的态度上,他力图保持“压制”与“约束”、“自由”与“放任”间的平衡,这对当今教育有很大的警示作用。     

甲骨卜辞中的灾祸词研究

先民由于生产力水平低下而有很深重的忧患意识,这体现在他们创造的文字之中.在甲骨文中,关于灾祸的词很多,常见的有:灾、(因)、尤、蛊、艰.引起灾祸的种类很多,主要有上帝神明和祖先、天象、战争、疾病等.     

对赫尔巴特学生观的再认识

赫尔巴特主张在教学中和教学外都要给予学生最大程度的自由,但又反对教育者对学生放任自流。在对学生的态度上,他力图保持“压制”与“约束”、“自由”与“放任”间的平衡,这对当今教育有很大的警示作用。     

《务虚笔记》研究综述

一部长达四十多万字的《务虚笔记》以其深邃的思想内涵和不同凡响的文体形式震撼文坛,作品中生存的困境与难题、人生的矛盾与悖论,对人生种种可能性的探讨,深沉的宗教情怀,直透心灵的语言,独特的隐喻方式,多声部回旋变奏的复调结构以及云遮雾绕的叙事美学,令众多研究者赞叹不已。     

focus on form教学综述

focus on form（以形式为中心）的教学模式是当前语言形式教学的主流,因其可以有效平衡语言形式和意义而备受关注。通过回顾其产生发展过程及理论依据,概括其实施方法,有利于理解其对外语教学的指导意义,指引相关研究方向。