偶氮苯修饰的DNA对引物延伸的光调控

研究偶氮苯单元修饰在核酸上控制引物延伸的行为。系统地筛选5、6、7和8个碱基的保护链通过4，4'-二羟甲基偶氮苯连接的25 mer DNA模板，并研究其在紫外光照前后调控的引物延伸效率。结果表明，具有7个保护碱基的C3对Pri.15和6个碱基短链的C2对Pri.17都具有较好的光调控延伸效果。其中C3，在Vent酶作用下紫外光照后引物延伸效率增加1倍以上。而C2，尽管紫外光照前增加了引物延伸的背景，在Vent酶催化下紫外光照射后的延伸产率达到91.4%，比紫外光照前增加84%。本工作为分子水平上研究基因功能、基因表达网络以及疾病的发生和发展提供了一种新的策略和研究手段。     

编辑——一种新的RNA加工方式

按照分子遗传学原理,遗传信息贮存于DNA或RNA的基因内,一个基因为一个转录单位,已知一个基因的顺序便可推断出相应的蛋白质顺序.mRNA前体的剪切,使内含子消除,使本来分开的外显子连接在一起,但成熟mRNA中的遗传信息总是来自于相应的基因.因此,mRNA链内编码区总是不长于其相应的基因.tRNA分子中的CCA末端,mRNA分子的“帽子”结构以及多聚腺苷酸或多聚尿苷酸结构,尽管大多是转录后添加的,但它们均发生在编码区以外的RNA末端,并不作为指导蛋白质序列的遗传信息.Berme等于1986年发现锥体虫线粒体细胞色素C氧化酶亚基I基因(COⅡ)与人或酵母相应基因比较,在编码蛋白的第170位氨基酸附近有一个移码突变,比较锥体虫细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ基因与次级转录产物,发现成熟mRNA在相应的移码突变位点附近有四个没有被基因DNA所编码的额外的尿苷酸.这四个尿苷酸刚好校正了基因的移码突变,由于采用DNA—RNA杂交技术找不到完全与mRNA相应的第二个COⅡ基因,因此,他们认为这四个尿苷酸是在转录过程中或转录后被插入的.他们把在mRNA前体上增加核苷酸的mRNA的加工方式称RNA的编辑.     

规律运动干预人类衰老过程的表观遗传学机制研究进展

摘要：人类的衰老过程受DNA编码信息、表观遗传学信息和环境因素的共同调控。DNA编码信息提供了合成生命所必需蛋白质的模板或蓝图，决定着人类的生命历程和最高寿限，而表观遗传学信息则提供了何时、何地以及如何应用DNA编码信息的指令。饮食、药物、体力活动等诸多环境因素可通过改变衰老相关基因的表观遗传学修饰，进而影响基因的开启与关闭，决定着个体寿命的长短。表观遗传学不但搭建起了环境—基因之间的桥梁或中介，而且把人类的寿限与寿命密切地联系在一起。规律运动作为一种环境表观遗传调制器，可在不影响DNA编码的前提下，通过诱导表观遗传学修饰改变调控衰老相关基因的表达水平，在延缓人类衰老进程中发挥着重要作用。本文从影响人类衰老过程的表观遗传调控机制入手，对规律运动在调控衰老过程端粒相关蛋白、脑衰老、糖脂代谢和肿瘤发生发展的表观遗传学机制研究进展进行综述，其目的在于从分子遗传学水平揭示运动干预延缓衰老之谜，为倡导通过增加体力活动实现健康老龄化提供科学依据。     

大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶与tRNALeu的相互作用 头孢菌素酰化酶的表达、翻译后加工和亚基重组

第一部分:为得到大量的大肠杆菌tRNA^Leu₁和tRNA^Leu₂,研究tRNA与亮氨酰-tRNA合成酶(LeuRS)的相互作用,用基因克隆的方法高表达并纯化了它们;测定了接受活力和被LeuRS催化的动力学常数;改进了RNA体外转录必需的T7RNA聚合酶的纯化方法,优化了转录条件,转录序列比文献值高10倍.用体外转录方法得到了各种在接受茎突变的tRNA^Leu变种,研究了一个在CP1结构域插入40个氨基酸残基的变种LeuRS-A对tRNA^Leu₂种等受体的识别,证明了tRNA^Leu₁和tRNA^Leu₂接受茎上的第一对硷基对是否摆动是LeuRS-A识别的关键.第二部分:在大肠杆菌中高表达头孢菌素酰化酶基因10倍以上.研究了它的α-亚基的N-端变化(LAEP…→MGIP…)对酶学动力学常数的影响.构建了带有不同抗菌素抗性和启动子的高表达质粒,研究了它们表达的特点,分析了这些质粒的不同用途.用含有编码该酶两个亚基的基因的相容质粒共转化的方法.研究了它们在体内的重组和前体的加工.研究结果表明,该酶可能属于一类新的N-端亲和水解的酰化酶.     

低氧预适应对小鼠骨骼肌Nrf2和线粒体呼吸链复合物蛋白表达及运动能力的影响

摘要：目的：低氧预适应是指经过短暂的轻度缺氧后，对后续的的严重缺氧产生耐受作用。最新的研究发现核因子E2相关因子2（Nrf2）除参与抗氧化作用外，对线粒体的生物合成和机体的能量代谢也发挥重要的调节作用。本研究试图通过对小鼠进行低氧预适应，探究其对骨骼肌Nrf2及线粒体呼吸链复合物蛋白表达和运动能力的影响。方法：健康8周龄C57BL/6J小鼠（WT）共40只，随机分为四组：未低氧预适应安静组（NC），低氧预适应安静组（HC），未低氧预适应低氧运动组（NE）和低氧预适应低氧运动组（HE），每组10只。对低氧预适应组小鼠进行48h持续低氧暴露，氧浓度为11.2%，未低氧预适应组小鼠饲养于常氧下。低氧预适应组低氧暴露结束后，对运动组小鼠进行运动能力测试。运动后即刻取小鼠腿部胫骨前肌检测Nrf2及线粒体呼吸链复合物的蛋白表达，实时荧光定量PCR检测NRF1、TFAM的基因表达。结果：（1）与未低氧预适应组相比，低氧预适应安静组和运动组Nrf2蛋白表达均显著增加（P<0.05）；（2）安静状态下，低氧预适应小鼠TFAM mRNA表达和线粒体呼吸链复合物CI-CV蛋白表达呈下降趋势。（3）一次性低氧力竭运动后，低氧预适应小鼠NRF1和TFAM mRNA和线粒体呼吸链复合物CI、CIII、CIV、CV蛋白表达出现增加趋势，CII蛋白表达显著下降（P<0.05）。（4）经过低氧预适应的小鼠在低氧环境中的运动能力显著增加，体现为力竭时小鼠跑动距离显著增加和达到力竭时所用时长显著增加。结论：48小时11.2%氧浓度的低氧预适应，可显著增加低氧运动后小鼠骨骼肌Nrf2和线粒体呼吸链复合物CIV和CV蛋白表达，这可能是低氧预适应提高小鼠运动能力的原因之一。     

黄芪对耐力运动大鼠CD4+/CD8+比值及身体成分的影响

中药黄芪是一种传统的补气中药,或许可调节机体的免疫功能及身体成分的作用.研究目的在于探讨黄芪对耐力运动的成年大鼠外周血T淋巴细胞亚群CD4+/CD8+的比值及身体成分的影响.30只成年雄性SD大鼠随机分为安静组(Con,n=10),5周跑台运动组(Exe,n=10,第1～3周,采用20～30min/d,5d/周的跑台运动,第4～5周进行25～35 min/d,7 d/ 周跑步训练)及运动补黄芪组(Exe+CM,n=10,第4～5周灌胃给药,运动方式同跑台运动组).结果发现:耐力训练可显著降低外周血T淋巴细胞CD4+/CD8+的比值,降低大鼠的肥胖程度;运动补黄芪组与单纯运动组相比,CD4+/CD8+的比值明显升高,肥胖度则无显著差异.结果提示:补充黄芪可提高运动大鼠CD4+/CD8+的比值,增加T淋巴细胞的免疫功能,但不影响运动大鼠的身体成分.     

基于2-(2'-羟基苯)噁唑啉锌的双核及四核配合物的设计合成、晶体结构及荧光性质

利用2-(2'-羟基苯)噁唑啉作为配体,通过与不同的锌盐进行反应,得到结构新颖的双核及四核配合物.对该系列化合物用元素分析,红外光谱进行表征.X-射线衍射单晶结构分析发现在配合物1中2-(2'-羟基苯)噁唑啉配体的羟基氧作为单原子桥连接2个锌离子,配合物2中除配体的羟基氧桥之外还存在甲氧基的氧原子桥连3个锌离子.配合物1 属于单斜晶系,空间群为P2₁,晶胞参数:a=9.384 2 Å(19), b=13.584 0 Å(30), c=11.138 0 Å(20), β=96.250°(30).配合物2属于三斜晶系,空间群为P-1,晶胞参数为 a=9.551 7Å(19), b=11.123 4 Å(22), c=11.182 6 Å(22), α=102.820°(30), β=114.988°(30), γ=100.806°(30).对配合物1的甲醇溶液中及固相荧光光谱进行研究,结果显示它有较好的荧光性质.     

强磁场下液态金属在竖直平板外的自由对流换热

托克马克装置中面向等离子体部件在不同的位置存在很大的温差，导致面向等离子体部件表面液态金属产生自由对流。以此为背景，实验研究液态金属受横向磁场影响下竖直壁面上的自由对流换热规律。实验采用K型热电偶测量环境与壁面两侧的温度，利用多普勒超声波测速仪测量壁面上的液态金属速度，分析不同磁场强度和加热热流密度条件对竖直平板外表面的流动与换热影响规律。研究表明：竖直平板的局部换热系数与特征长度成反比，即距加热平板起始段越远换热越弱，同时增强加热功率使表面换热系数增加。在强磁场条件下，壁面边界层的流动与换热均普遍被抑制；但是在弱磁场下，增加磁场会强化平板表面的自由对流与换热，根据实验结果发现该转折点出现在磁相互作用数为1~4的范围。     

低氧、力竭运动对大鼠骨骼肌细胞凋亡及bcl-2、bax表达的影响

使用组织染色、末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)、DNA电泳及蛋白免疫组织化学法对低氧、力竭运动后骨骼肌的凋亡情况进行了较深入研究;从凋亡的角度探讨了低氧、离心运动诱导的肌肉损伤.研究结果表明:(1)急性力竭实验组中低氧对照组bax、bcl-2、bcl-2/bax的表达及TUNEL法测试细胞凋亡的结果揭示低氧暴露7天能够引起骨骼肌细胞凋亡明显增加.(2)对急性力竭组中常氧、低氧运动组不同时相的观察,发现运动后即刻、1天及2天骨骼肌凋亡较之安静对照组明显增加,最高时相出现在运动后2天,且有统计学意义.(3)急性低氧、力竭运动后激活了大鼠骨骼肌细胞的自杀程序.可能是由于运动后钙离子内环境紊乱,或活性氧生成增加而造成的.(4)从本研究可以推测细胞凋亡可能是造成低氧、力竭运动后骨骼肌损伤机制之一.     

青少年羽毛球运动员的下肢关节力量研究——非优势侧

摘要：选取上海市体育运动学校男子羽毛球运动队的14名基本资料和运动成绩相近的运动员为实验对象，对照组与实验组各7名，对照组按照常规的技术训练和下肢整体力量训练，实验组对下肢关节肌肉有针对性的力量训练（非优势侧的力量训练）。通过biodex仪器对下肢膝、踝主要关节周围的肌肉力量进行监测分析羽毛球运动员各关节屈伸肌群峰力矩的均值。结论：1）有针对性的训练可改变两侧下肢的差异水平，训练可以减小两侧下肢差距，使两侧下肢肌肉工作能力更加接近。2）青少年羽毛球运动员在两种角速度下优势侧和非优势侧的伸肌峰力矩都比屈肌峰力矩大，但都随角速度的增快而逐渐下降，说明青少年运动员的力量耐力很小，经过非优势侧力量训练能提高青少年羽毛球运动员的力量耐力。3）运动员经过训练后优势与非优势侧关节的屈伸肌群肌力矩的平衡有很大的改善。4）训练前后两侧膝关节等速收缩屈伸肌群峰力矩差异对比分析:对非优势侧的力量加强可减缓下肢肌肉持续的受力过程。5）通过与实验数据发现，青少年羽毛球运动员的爆发力很难通过短期的训练得到显著的效果，但运动员的最大力量和灵敏性训练在青少年时期是可以提高的，但训练中的负荷和频率要控制。     

有效扩增小片段DNA的一种方法

利用单链DNA连接酶可以连接单链DNA的性质将小片段DNA自连成环,随后利用phi29 DNA聚合酶进行恒温滚环复制,将扩增产物进行酶切,得到扩增后的小片段DNA.实验结果表明,单链DNA连接酶能有效地将30bp的小片段DNA自连成环,以phi29 DNA聚合酶扩增出大于10kb的DNA片段,产物经酶切后可进行第二轮扩增,并证明其成环方式为自成环.该方法能有效扩增小片段DNA.     

半乳甘露寡糖对断奶仔猪肠道微生物多样性的影响

采用PCR-DGGE方法,研究添加0.25%林肯霉素及0.1%、0.2%和0.3%的半乳甘露寡糖(GMOS)对断奶仔猪肠道微生物多样性的影响.结果表明,结肠微生物DNA电泳条带的数量明显多于回肠中的数量;断奶后0 d的回肠条带数量多于断奶后14 d的数量,但两者间结肠微生物种类差异不大.唾液乳酸杆菌、瘤胃球菌和大肠杆菌为仔猪回肠共有菌;而金色葡萄球菌、唾液乳酸杆菌、瘤胃球菌、枯草芽孢杆菌和产气荚膜梭状芽孢杆菌是结肠的共有菌.由相似性分析可见,各日粮处理间电泳带谱之间相似性较低,除了对照组和0.2%GMOS组断奶仔猪回肠微生物各带谱间存在80%的相似性外,其他各组的回肠微生物各谱带间的相似性大部分在20%~50%之间.这表明饲喂不同日粮的断奶仔猪,其肠道相同微生物种群数量相同者较少,各自特有的微生物种群数量较多.     

基于数据融合的多时延基因调控网络的构建

提出一种基于动态贝叶斯网络的基因调控网络重构方法LC-DBN. 该方法寻找各基因最优的调控时延;同时融合时序微阵列数据和转录因子连接位点数据,构建基因调控网络. 对25个酵母基因调控网络进行重构实验,结果显示,构建的网络敏感度较Tan方法提高0.72%,精确度提高0.16%.     

刀具半径补偿和长度补偿在数控铣削中的应用

在数控铣削加工中,灵活应用刀具补偿对难解决的工程实例问题有着重大意义.从提高数控铣削编程效率和减少编程存放内存出发,探讨刀具补偿的使用方法.在数控铣削加工中,刀具半径补偿和刀具长度补偿的灵活应用,对零件质量和加工效率有非常重大的影响。     

藏獒基因组DNA提取方法的比较研究

分别采用酚一氯仿法和改进的盐析法对藏獒血液基因组DNA进行了比较提取．并以提取的基因组DNA为模板进行了RAPD-PCR扩增．结果表明．酚-氯仿法提取的藏獒血液基因组DNA在浓度和纯度上均显著的高于改进的盐析法（P〈0．05）,但两种方法所提取的藏獒基因组DNA都可用于RAPD分析．     

CBA职业联赛监管双系统运行现状与博弈模型研究*

从CBA职业联赛监管运行现状出发,论述了联赛监管的双系统构成和二者间的监管博弈模型.得出结论:中国篮球运动管理中心与中国篮球运动协会分别行使政府和行业监管职能对当前联赛进行双系统监管,二者具有一定的边界与冲突,应在联赛不同领域运用不同的监管手段和策略进行充分博弈、科学选择和协同监管,才能实现CBA职业联赛健康、持续且高效的发展道路.     

网络计算机的发展及应用

网络计算机(NC)是近期发展较为迅速的一项新技术。本文介绍了NC的概念、发展、以及与PC的比较;结合一个NC在多媒体网络教室中的应用实例,阐述了NC所具有的优点,即发展NC不仅能降低成本、有利于信息安全管理,而且有利于我国发展自主知识产权、提升我国产业核心竞争力;肯定了NC在我国信息产业发展中的广阔前景。     

C6132普通车床数控化改造设计

通过对C6132普通车床的数控化改造,阐述了车床数控化改造的方案,详细论述了C6132的主轴传动系统、进给传动系统和数控系统电气接口的改造过程,为企业进行数控化改造提供了途径。